รากฐานวุ้นสีเขียวสดใสการเตรียมและการใช้งาน

วุ้นสีเขียวสดใส มันเป็นสื่อวัฒนธรรมที่มั่นคงมีระดับหัวกะทิที่สูง มันถูกใช้เฉพาะสำหรับการแยกสายพันธุ์ของเชื้อซัลโมเนลล่า แต่มีข้อยกเว้นบางอย่างเช่น typhi และสายพันธุ์ paratyphi ที่ไม่เติบโตในสื่อนี้.

การค้นหาสกุลซัลโมเนลล่ามักพบในอุจจาระน้ำหรืออาหาร ในแง่นี้สื่อนี้มีประโยชน์มาก วุ้นนี้ถูกสร้างขึ้นในปี 1925 โดย Kristensen, Lester และ Jurgens ซึ่งดัดแปลงโดย Kauffmann ในภายหลัง.

มันประกอบด้วย pluripeptonas จากการย่อยสลายของเนื้อเยื่อสัตว์และการย่อยของตับอ่อนของเคซีนเช่นกันยังมีสารสกัดจากยีสต์โซเดียมคลอไรด์แลคโตสซูโครสน้ำตาลฟีนอลสีแดงสดใสสีเขียวและวุ้นวุ้น.

มันโดดเด่นด้วยการเป็นสื่อที่ไม่เอื้ออำนวยมากสำหรับแบคทีเรียส่วนใหญ่นิยมการเจริญเติบโตของเชื้อ Salmonella อย่างไรก็ตามโคลิฟอร์มบางชนิดสามารถดำรงชีวิตอยู่ได้.

มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะเน้นว่าในสื่อนี้สกุล Shigella ไม่เติบโตและไม่ Salmonella typhimurium, หรือ Salmonella paratyphi. ดังนั้นหากต้องการแยกเชื้อจุลินทรีย์เหล่านี้ควรใช้วิธีการอื่นเช่น XLD agar เป็นต้น.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
  • 1.1 วุ้นสีเขียวสดใส
  • 1.2 พันธุ์วุ้นสีเขียวสดใส (BGA)
• 2 การเตรียมการ
• 3 การใช้งาน / แอปพลิเคชัน
• 4 การควบคุมคุณภาพ
• 5 อ้างอิง

มูลนิธิ

วุ้นสีเขียวสดใส

ส่วนประกอบแต่ละอย่างที่ประกอบขึ้นเป็นสื่อกลางมีหน้าที่เฉพาะที่กำหนดคุณสมบัติและคุณสมบัติของวุ้น.

pluripeptonas และสารสกัดจากยีสต์เป็นแหล่งของสารอาหารที่จุลินทรีย์ใช้ไนโตรเจนและแร่ธาตุที่จำเป็นต่อการพัฒนา แลคโตสและซูโครสเป็นแหล่งพลังงานสำหรับจุลินทรีย์ที่มีความสามารถในการหมักพวกมัน.

สีเขียวสดใสเป็นสารยับยั้งที่ป้องกันการพัฒนาของแบคทีเรียแกรมบวกและจุลินทรีย์แกรมลบจำนวนมาก.

โซเดียมคลอไรด์ให้ความเสถียรของออสโมติกต่อตัวกลาง ในขณะที่ฟีนอลสีแดงเป็นตัวบ่งชี้ของค่า pH มันจะเปลี่ยนสีเมื่อตรวจจับการผลิตกรดจากการหมักคาร์โบไฮเดรต.

โคโลนีที่ไม่ผ่านการหมักของแลคโตสและซูโครสจะเติบโตในสื่อสีขาวสีชมพูหรือโปร่งใสบนพื้นหลังสีแดง ตัวอย่างเช่นแบคทีเรียในสกุล Salmonella.

ในขณะที่แบคทีเรียแลคโตสที่ถูกหมักหรือน้ำตาลซูโครสสามารถเจริญเติบโตได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อนี้พวกมันจะพัฒนาโคโลนีสีเขียวเหลืองหรือเขียวแกมเหลืองบนพื้นหลังสีเหลืองเขียว ตัวอย่างเช่น, Escherichia coli และ Klebsiella pneumoniae.

สายพันธุ์ของวุ้นสีเขียวสดใส (BGA)

มีสายพันธุ์อื่น ๆ ของวุ้นสีเขียวสดใส; novobiocin วุ้นสีเขียวสดใสกลูโคส (NBG) และ novobiocin วุ้นสีเขียวสดใสกลีเซอรอลแลคโตส (NBGL).

Novobiocin วุ้นน้ำตาลกลูโคสสีเขียวสดใส (NBG)

มีทริปโตเซสถั่วเหลืองวุ้น, เฟอริกแอมโมเนียมซิเตรต, โซเดียมไธโอซัลเฟตเพนทาไฮเดรต, ฟีนอลแดง, กลูโคส, เขียวสดใส, โนบิโอซิซินและน้ำกลั่น.

ทำหน้าที่ในการแยกเชื้อ Salmonella จากตัวอย่างอุจจาระ.

ในกรณีนี้สีเขียวสดใสและโนโวบีซินเป็นสารยับยั้งการยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและจุลินทรีย์เชิงลบแกรมบางชนิด.

โซเดียมไธโอซัลเฟตเป็นแหล่งของซัลเฟอร์และเฟอร์ริกซิเตรตเป็นแหล่งของธาตุเหล็กทั้งคู่จำเป็นต้องเปิดเผยการผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์ผ่านการก่อตัวของตะกอนดำของเฟอร์ริกซัลไฟด์.

กลูโคสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่หมักได้และฟีนอลสีแดงเป็นตัวบ่งชี้ค่า pH.

ในสื่อนี้อาณานิคมของเชื้อ Salmonella มีขนาดใหญ่ที่มีจุดศูนย์กลางสีดำล้อมรอบด้วยรัศมีสีแดงและตามด้วยพื้นที่ที่มองเห็นได้ชัดเจน บางสายพันธุ์ Citrobacter freundii ผลิตโคโลนีเหมือนกันกับ Salmonella.

ไบโอดีเซลกลีเซอรอลแลคโตสสีเขียวสดใส (NBGL)

สื่อนี้ประกอบด้วยทริปโตเซสถั่วเหลืองวุ้นเฟอริกแอมโมเนียมซิเตรตโซเดียมไธโอซัลเฟตแลคโตสกลีเซอรอลสีเขียวสดใสโนบิโอซิซินและน้ำกลั่น.

ความแตกต่างของสื่อนี้กับก่อนหน้านี้คือกลูโคสที่ถูกแทนที่ด้วยแลคโตสและกลีเซอรอลและฟีนอลสีแดงไม่ได้ใช้.

สื่อนี้ยังใช้เพื่อแยกเชื้อ Salmonella ซึ่งเป็นอาณานิคมพัฒนาดำโดยการผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์.

มีเพียงอาณานิคมที่ไม่ได้ผลิตกรดจากกลีเซอรอลหรือแลคโตสเพื่อให้ได้ผลผลิต H₂ก็เพียงพอแล้วเพราะค่าความเป็นกรดต่ำจะรบกวนการสร้าง H₂S. สิ่งนี้ส่งผลให้มีอาณานิคมแบบไม่มีสีสำหรับโปรเตอุสและสปีชีส์แบคทีเรียส่วนใหญ่.

การจัดเตรียม

-น้ำหนัก 58 กรัมของอาหารที่ได้จากการอบแห้งในเชิงพาณิชย์ เติมในน้ำกลั่นสองลิตร ผสมรอสักครู่แล้วส่งชุดเตรียมไปยังแหล่งความร้อนจนกว่ามันจะละลายหมด.

-นึ่งที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาทีไม่เกินเวลาฆ่าเชื้อ.

-ปล่อยให้ยืนและเสิร์ฟแม้กระทั่งในจานเพาะเชื้อที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ค่า pH สุดท้ายควรเป็น 6.9 ± 0.2.

-อนุญาตให้แข็งและเก็บในตู้เย็นจนกว่าจะใช้ ก่อนปลูกแผ่นควรใช้อุณหภูมิห้อง.

-ผงแป้งเป็นสีเขียวและพร้อมที่จะใช้สีน้ำตาลส้มหรือสีแดงอมเขียวขึ้นอยู่กับค่าความเป็นกรดด่างและเชิงพาณิชย์ สีน้ำตาลที่บ่งบอกว่าวุ้นนั้นมีความร้อนสูงเกินไป.

-เมื่อวุ้นแข็งตัวแล้วจะไม่แนะนำให้ทำการชุบใหม่เนื่องจากตัวกลางจะเสื่อมสภาพ.

ใช้ / แอปพลิเคชัน

สื่อนี้ใช้สำหรับการค้นหาสายพันธุ์ของเชื้อซัลโมเนลล่าจากตัวอย่างอุจจาระและผลิตภัณฑ์จากนมและอื่น ๆ.

เนื่องจากเป็นสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยจึงขอแนะนำให้ปลูกหัวเชื้อที่อุดมสมบูรณ์หากใช้ตัวอย่างโดยตรง มิเช่นนั้นควรทำการเตรียมชิ้นงานก่อนและตกแต่งชิ้นงานก่อนทำการปลูกในสื่อนี้.

เนื่องจากเชื้อ Salmonella บางสายพันธุ์ถูกยับยั้งหรือเติบโตด้วยความยากลำบากจึงแนะนำให้ใช้สื่อนี้ร่วมกับ agars คัดเลือกอื่นสำหรับ Salmonella.

อาณานิคมทั้งหมดที่มีเชื้อ Salmonella ที่เป็นลักษณะจะต้องได้รับการทดสอบทางชีวเคมีเพื่อระบุขั้นสุดท้าย.

การควบคุมคุณภาพ

เพื่อทดสอบการทำงานที่ดีของสื่อวุ้นสีเขียวสดใส ATCC สามารถใช้เพื่อสังเกตการพัฒนาของสายพันธุ์เดียวกันได้.

สายพันธุ์ที่ใช้บ่อยที่สุดสำหรับการควบคุมคุณภาพคือ: เชื้อ Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, โพรทูส mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, เชื้อ Staphylococcus aureus ATCC 6538.

3 คนแรกจะต้องให้อาณานิคมสีชมพูหรือขาวใสบนพื้นหลังสีแดง เชื้อซัลโมเนลล่ามีพัฒนาการที่ดีและโปรเตอุสที่มีการเติบโตแบบเบาบางหรือสม่ำเสมอ.

Klebsiella และ Escherichia คาดว่าจะมีอาณานิคมสีเหลือง - เหลืองที่มีพื้นหลังสีเหลืองและในกรณีของ Shigella และ Staphylococcus.

สื่อที่ถูกคายน้ำควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในที่แห้งเนื่องจากวัสดุดูดความชื้นได้ดี.

การอ้างอิง

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratory S.A. วุ้นสีเขียวสดใส 2009
2. ห้องปฏิบัติการอังกฤษ วุ้นสีเขียวสดใส 2015.
3. ห้องปฏิบัติการ BD BD Brilliant Green Agar 2013.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินา, Panamericana บรรณาธิการ.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา Panamericana S.A บทบรรณาธิการ