รากฐานถั่วเหลืองtripticaseínaเตรียมและการใช้งาน

trypticasein ซอยวุ้น หรือ trypticase soy agar เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่ผ่านการคัดเลือกและมีคุณค่าทางโภชนาการ มันถูกกำหนดด้วยตัวอักษร TSA สำหรับคำย่อในภาษาอังกฤษ Trypticase Soy Agar มันประกอบด้วย triptein, ถั่วเหลืองเปปโตน, โซเดียมคลอไรด์และวุ้น.

ด้วยพลังที่มีคุณค่าทางโภชนาการสูงจึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่มีความต้องการปานกลางและไม่ต้องการ สื่อที่ไม่มีอาหารเสริมเพิ่มเติมไม่แนะนำสำหรับวัฒนธรรมหลัก แต่มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการปลูกฝังสายพันธุ์แท้และทำให้สามารถใช้งานได้ในการใช้งานอื่น ๆ.

นอกจากนี้วุ้นนี้ยังทำหน้าที่เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียมสื่อที่ได้รับการตกแต่งเช่นเลือดวุ้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อจำเป็นต้องสังเกตรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงและติดตั้ง taxa ของ optoquine และ bacitracin ซึ่งจำเป็นในการวินิจฉัยโรค Streptococcus pneumoniae และ Streptococcus pyogenes ตามลำดับ.

ในทางกลับกันเมื่อรวมกับยาปฏิชีวนะจะมีประโยชน์ในการแยกจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบมีส่วนร่วมและแบบเข้มงวดที่มีความสำคัญทางคลินิกจากตัวอย่างที่มีฟลอราผสม.

ในที่สุดองค์ประกอบของ tripticasein soy agar และประสิทธิภาพของมันตรงตามข้อกำหนดที่กำหนดโดยตำรับยาที่แตกต่างกัน (ยุโรปญี่ปุ่นและอเมริกาเหนือ).

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
• 2 การเตรียมการ
  • 2.1 Tripticasein แผ่นวุ้นถั่วเหลือง
  • 2.2 Tripticasein แผ่นเปลือกถั่วเหลืองเสริมด้วยเลือด
  • 2.3 Tripticasein แผ่นเปลือกถั่วเหลืองเสริมด้วยเลือดอุ่น
  • 2.4 เวดจ์ของวุ้นถั่วเหลือง
• 3 ใช้
• 4 เมล็ด
• 5 การควบคุมคุณภาพ
  • 5.1 การควบคุมความเป็นหมัน
  • 5.2 การควบคุมการเจริญเติบโต
  • 5.3 การควบคุมการเจริญเติบโตและรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงของวุ้นถั่วเหลือง tripticasein เสริมด้วยเลือด
• 6 อ้างอิง

มูลนิธิ

สำหรับการพัฒนาที่เหมาะสมของแบคทีเรียเป็นสิ่งจำเป็นการมีอยู่ของพลังงานเช่นกรดอะมิโน, วิตามิน, purine ฐานและ pyrimidic.

ในแง่นี้ triptein และถั่วเหลืองเปปโตนให้สารอาหารเหล่านี้กับจุลินทรีย์จึงช่วยให้พวกเขาพัฒนาอย่างเต็มที่ อย่างไรก็ตามสำหรับแบคทีเรียที่ต้องการมีความจำเป็นต้องเสริมวุ้นนี้ด้วยเลือดที่ได้รับการปรับแต่งหรือเลือดอุ่นเพื่อเพิ่มการเสริมสมรรถนะ.

ในทางกลับกันหากเพิ่มยาปฏิชีวนะลงในอาหารก็จะกลายเป็นอาหารที่เลือกสรร คุณยังสามารถเพิ่มยีสต์สกัด 0.6% เพื่อช่วยในการแยกชนิดของสกุล Listeria ในขณะที่เพิ่มซีสทีนเทลลูไรท์ และ เลือดแกะนั้นเหมาะสำหรับ Corynebacterium diphteriae.

ในที่สุดโซเดียมคลอไรด์ให้สมดุลออสโมติกกับสื่อและวุ้นให้ความมั่นคงที่มั่นคง.

การจัดเตรียม

Tripticasein แผ่นวุ้นถั่วเหลือง

ในการจัดเตรียม trypticasein soy agar ควรมีการชั่งน้ำหนักสื่อการค้าที่ถูกอบแห้ง 40 กรัมในระดับดิจิตอล ละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตรที่บรรจุอยู่ใน fiola.

ส่วนผสมได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 5 นาทีแล้วนำไปยังแหล่งความร้อนเพื่อช่วยในการละลายของสื่อ ควรกวนบ่อยและทิ้งไว้ให้เดือดประมาณ 1 หรือ 2 นาที ต่อจากนั้นตัวกลางจะถูกฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดันที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที.

อนุญาตให้เย็นถึง 50 ° C และแจกจ่ายในจานเลี้ยงเชื้อปลอดเชื้อ ปล่อยให้แข็ง, คว่ำ, สั่งใน plaquers และเก็บในตู้เย็น.

ค่า pH สุดท้ายของสื่อควรเป็น 7.3 ± 0.2.

ควรคำนึงถึงสีของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ขาดน้ำคือสีเบจอ่อนและควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิระหว่าง 10 ถึง 35 °ซในที่แห้ง.

ในส่วนของมันวุ้นที่เตรียมไว้นั้นเป็นสีเหลืองอำพัน ควรเก็บแผ่นที่เตรียมไว้ในตู้เย็น (2 ถึง 8 °ซ) จนกว่าจะใช้งาน.

แผ่นต้องมีอุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน.

Tripticasein แผ่นวุ้นถั่วเหลืองเสริมด้วยเลือด

Blood agar จัดทำขึ้นโดยเพิ่มเลือดที่ได้รับการปรับ 5% ในช่วงเวลาที่ให้ความเย็นกับ trypticasein ถั่วเหลือง agar ที่อุณหภูมิ 50 องศา ส่วนผสมถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยการหมุนด้วยการเคลื่อนไหวที่อ่อนโยน.

เสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อ สีของสื่อควรเป็นสีแดงเชอร์รี่.

Tripticasein แผ่นวุ้นถั่วเหลืองเสริมด้วยเลือดอุ่น

เพื่อเตรียม agar เลือด TSA ตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ข้างต้นเหมือนกัน แต่เมื่อปล่อยให้ autoclave ได้รับอนุญาตให้ยืนจนกว่าอุณหภูมิของสื่อเป็นประมาณ 56 และ 70 ° C ในเวลานั้นเลือดจะถูกผสมและผสมกันจนกระทั่งสื่อเปลี่ยนเป็นสีน้ำตาล.

เสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อ สีของสื่อเป็นสีน้ำตาลช็อกโกแลต.

เวดจ์ของวุ้นถั่วเหลือง tripticaseine

ขั้นตอนการเตรียมวุ้นเหมือนกันกับที่อธิบายไว้สำหรับเพลทที่มีความแตกต่างที่แทนที่จะเสิร์ฟอาหารจาน Petri มันมีการกระจายระหว่าง 10 และ 12 มล. ในหลอดที่มีฝา Bakelite ก่อนการฆ่าเชื้อ.

ต่อจากนั้นท่อจะถูกทำด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที เมื่อออกไปพวกเขาจะได้รับความช่วยเหลือจากฝ่ายสนับสนุนและอนุญาตให้ตนเองแข็งตัวได้.

เวดจ์ที่เตรียมจะถูกหว่านโดยพื้นผิวและทำหน้าที่ในการรักษาเชื้อจุลินทรีย์ที่ไม่ต้องการในเวลาที่กำหนด.

การใช้งาน

Trypticasein soy agar ใช้ในกรณีต่อไปนี้:

-เพื่อเป็นฐานในการเตรียมวุ้นเลือดคลาสสิกที่ใช้เป็นประจำในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่.

-การแยกเชื้อแบคทีเรียที่เรียกร้อง.

-การสังเกตรูปแบบของภาวะเม็ดเลือดแดงแตก.

-การดำเนินการทดสอบวินิจฉัย.

-เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อพิเศษสำหรับ Corynebacterium diphteriae, ด้วยเทลเลียมซีสตีน และ เลือดแกะ.

-เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียม agar blood lamb, kanamycin-vancomycin มากขึ้นสำหรับการเจริญเติบโตของ anaerobes โดยเฉพาะ Bacteroides sp.

-สำหรับการบำรุงรักษาสายพันธุ์ที่ไม่ต้องการ (Bacterioteca).

-แอโรบิกนับจำนวนจุลินทรีย์ในการศึกษาขีด จำกัด จุลินทรีย์ของตัวอย่างน้ำสิ่งแวดล้อมอาหารและเครื่องสำอาง.

ปลูก

ตัวอย่างสามารถเพาะได้โดยตรงบนพื้นผิวของ trypticasein ที่วุ้นถั่วเหลืองเสริมด้วยเลือดหรือสารเติมแต่งอื่น ๆ มันถูกหว่านโดยความอ่อนเพลีย.

ในขณะที่แผ่นเปลือกถั่วเหลือง tripticasein ที่ไม่มีสารเติมแต่งมักใช้ในการเพาะเลี้ยงเชื้อจุลินทรีย์สายพันธุ์ย่อย (แบคทีเรียหรือยีสต์).

การควบคุมคุณภาพ

การควบคุมความปลอดเชื้อ

ในการตรวจสอบความแห้งแล้งของสื่อต่าง ๆ ที่เตรียมด้วย trypticasein soy agar ขอแนะนำให้ทำสิ่งต่อไปนี้: จากแต่ละชุดที่เตรียมไว้หนึ่งหรือสองแผ่นหรือหลอดควรบ่มโดยไม่มีการฉีดวัคซีนที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ในทุกกรณีจะต้องคงอยู่โดยไม่มีการเติบโต.

หากพบการปนเปื้อนต้องจับฉลากทั้งหมด.

ควบคุมการเจริญเติบโต

เพื่อศึกษาการทำงานที่เหมาะสมของ trypticasein soy agar สามารถใช้แบคทีเรียสายพันธุ์ต่อไปนี้: Escherichia coli ATCC 8739, เชื้อ Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 และ Enterococcus faecalis ATCC 29212.

สายพันธุ์จะถูกหว่านและบ่มใน aerobiosis ที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง.

ในทุกกรณีการเติบโตจะต้องเป็นที่น่าพอใจ.

คุณยังสามารถใช้เห็ดเป็นคอมเพล็กซ์ Candida albicans ATCC 10231 และ Aspergillus ไนเจอร์ ATCC 16404 คาดว่าการเติบโตที่ดีสำหรับทั้งสองสายพันธุ์.

การควบคุมการเจริญเติบโตและรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงของไทรอะซิติกถั่วเหลืองที่เสริมด้วยเลือด

เพื่อตรวจสอบการทำงานที่เหมาะสมของ agar เลือดที่เตรียมด้วยฐานนี้สามารถใช้สายพันธุ์ต่อไปนี้: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 และ Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

พวกเขาถูกหว่านและบ่มที่ 37 ° C ใน microaerophilicus เป็นเวลา 24 ชั่วโมง.

ในทุกกรณีการเติบโตจะต้องเป็นที่น่าพอใจโดยคำนึงถึงสิ่งต่อไปนี้ S. pyogenes เบต้า - ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก (รัศมีชัดเจนรอบอาณานิคม) และในทั้งสองสายพันธุ์ของ S. pneumoniae hemolysis อัลฟา (รัศมีสีเขียวรอบ ๆ อาณานิคม) ควรสังเกต.

การอ้างอิง

1. ผู้มีส่วนร่วมใน Wikipedia Trypticase ฉันเป็นวุ้น Wikipedia, สารานุกรมเสรี 17 ธันวาคม 2018, 15:47 UTC มีให้ที่: https://en.wikipedia.org
2. ห้องปฏิบัติการ Britania Tryteine ​​agar ถั่วเหลือง 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com
3. Neogen Laboratories อันมีค่าถั่วเหลือง มีจำหน่ายที่: foodsafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา Panamericana S.A บทบรรณาธิการ.
5. BD Laboratories Trypticase ฉันเป็นวุ้น 2014 มีจำหน่ายที่: .bd.com