มูลนิธิวุ้นเชื้อ Salmonella-Shigella เตรียมและใช้

Salmonella-Shigella วุ้น รู้จักกันในนาม SS agar เป็นสื่อกลางในการคัดเลือกและสร้างความแตกต่างที่ได้รับการออกแบบมาเป็นพิเศษสำหรับการแยกแบคทีเรีย enteropathogenic ของเชื้อ Salmonella สกุลสามัญและ Shigella จากตัวอย่างทางสิ่งแวดล้อมและทางคลินิก.

SS agar มีองค์ประกอบที่ซับซ้อน ประกอบด้วยสารสกัดจากเนื้อเปปโตนแลคโตสเกลือน้ำดีโซเดียมซิเตรตโซเดียมไธโอซัลเฟตเฟอร์ริกซิเตรตวุ้นสีแดงกลางสีเขียวสดใสและน้ำกลั่น ด้วยการเลือกสรรที่ยอดเยี่ยมจึงเป็นไปได้ที่จะปลูกพืชตัวอย่างที่มีพืชผสมมากมาย.

ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยานั้นเชื้อ Salmonella-Shigella ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจสอบการมีอยู่ของเชื้อ Salmonella และ Shigella ในตัวอย่างอุจจาระอุจจาระร่วงน้ำเสียน้ำดื่มและอาหาร.

บางครั้งมีความจำเป็นต้องใช้น้ำซุปก่อนการเสริมสมรรถนะ (น้ำซุปแลคโตส) และการเสริมสมรรถนะ (น้ำซีสทีนซีสตีน) เพื่อฟื้นฟูสายพันธุ์เชื้อ Salmonella.

ขั้นตอนเหล่านี้จำเป็นต้องมีเมื่อมีการสงสัยว่ามีเชื้อ Salmonella อยู่ในปริมาณที่ต่ำมากหรือในที่ซึ่งความเครียดอาจถูกทำร้ายโดยกระบวนการทั่วไปของอุตสาหกรรมการผลิตอาหารแปรรูปส่วนใหญ่ นอกจากนี้ยังแนะนำให้เพิ่มตัวอย่างอุจจาระจากผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ.

ต่อจากนั้นน้ำซุปที่ได้รับการเสริมสามารถนำไปเพาะเลี้ยงในวุ้นเชื้อ Salmonella-Shigella และสื่ออื่น ๆ ที่คล้ายคลึงกันเช่นไซโลสไซโล, deoxysiloxane lysine (XLD) และเอ็นไซม์ Hektoen.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
  • 1.1 พลังทางโภชนาการ
  • 1.2 ความสอดคล้อง
  • 1.3 Selective
  • 1.4 ส่วนต่าง
• 2 การเตรียมการ
• 3 ใช้
• 4 ข้อ จำกัด
• 5 การควบคุมคุณภาพ
• 6 อ้างอิง

มูลนิธิ

แต่ละองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อ Salmonella-Shigella มีฟังก์ชั่นเฉพาะและส่วนผสมโดยรวมทำให้คุณสมบัติที่เป็นลักษณะเฉพาะ.

พลังงานมีคุณค่าทางโภชนาการ

สารสกัดจากเนื้อสัตว์และเปปโตน (เคซีนที่ย่อยแล้วและเนื้อเยื่อของสัตว์) ให้สารอาหารที่จำเป็น (ไนโตเจนคาร์บอนและวิตามิน) สำหรับการพัฒนาของจุลินทรีย์ที่สามารถทนต่อส่วนที่เหลือของส่วนประกอบ.

ความมั่นคง

agar-agar รับผิดชอบในการสร้างความมั่นคงที่มั่นคงให้กับสื่อ.

เลือก

สื่อนี้มีการคัดเลือกสูงเนื่องจากมีเกลือน้ำดีโซเดียมซิเตรตและสีเขียวสดใส ดังนั้นจึงยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกทั้งหมดและแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่รวมถึงโคลิฟอร์ม.

ในขณะที่แบคทีเรียของสกุลซัลโมเนลล่าและบางสายพันธุ์ของชิเกลล่าจะสนับสนุนสารเหล่านี้.

ส่วนใหญ่สกุลซัลโมเนลล่านั้นทนต่อเกลือน้ำดีได้มากดังนั้นพวกเขาจึงสามารถมีชีวิตอยู่ในถุงน้ำดีของผู้ป่วยบางรายที่ส่งเชื้อแบคทีเรียออกมาทางอุจจาระ.

ค่า

แลคโตสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่ผ่านการหมักซึ่งช่วยแยกแยะความแตกต่างของแลคโตสที่ได้จากการหมักที่ไม่ผ่านกระบวนการหมัก คุณสมบัตินี้พิสูจน์ได้จากการมีตัวบ่งชี้ค่า pH ซึ่งในสื่อนี้คือฟีนอลสีแดง.

แลคโตสที่ได้จากการหมักจะให้โคโลนีสีแดงในขณะที่สายพันธุ์ที่ไม่ผ่านการหมักจะไม่มีสี ลักษณะนี้มีความสำคัญเนื่องจาก Salmonella และ Shigella ไม่หมักแลคโตส.

ในทางกลับกันสื่อนี้มีโซเดียมไธโอซัลเฟตเป็นแหล่งของกำมะถันและเฟอร์ริกซิเตรตเป็นแหล่งของธาตุเหล็ก สารประกอบทั้งสองสามารถแยกแยะแบคทีเรียที่มีความสามารถในการผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์ ปฏิกิริยาเหล่านี้จะทำให้เกิดการตกตะกอนดำของเฟอร์ริกซัลไฟด์ที่ไม่ละลายน้ำและมองเห็นได้.

สถานที่ให้บริการนี้มีสายพันธุ์ของเชื้อ Salmonella โดยปกติแล้วอาณานิคมของพวกมันจะไม่มีแบนโดยมีจุดสีดำอยู่ตรงกลาง ส่วนที่เหลือของ Salmonellas จะไม่ผลิต H₂S และพัฒนาเป็นอาณานิคมที่ไม่มีสี.

ในอีกทางหนึ่งอาณานิคมของพืชจำพวกชิเกลล่านั้นไม่มีสีแบนโดยไม่มีการใส่ร้ายป้ายสี.

การจัดเตรียม

วิธีนี้ง่ายมากในการเตรียม.

ชั่งน้ำหนัก 63 กรัมของตัวกลางการค้าที่ถูกทำให้แห้งและละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร ความร้อนการแก้ปัญหาและกวน ส่วนผสมสามารถไปถึงเดือดนานถึงนาที.

สื่อนี้ไม่ควรทำการนึ่งอัตโนมัติ หลังจากการละลายมันจะถูกเสิร์ฟโดยตรงบนแผ่นผ่านการฆ่าเชื้อครั้งเดียวหรือสองครั้ง.

เมื่อแข็งตัวพวกเขาจะถูกจัดเรียงในทางกลับกันในผู้ผลิตแผ่นโลหะและเก็บไว้ในตู้เย็น (2-8 ° C) จนกว่าพวกเขาจะใช้.

สื่อหลังจากเตรียมควรมีค่า pH 7.2 ± 0.2 และสีส้มแดง.

มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะอนุญาตให้มีแผ่นเหล็กที่จะมีอารมณ์ก่อนที่จะหว่านตัวอย่าง คุณสามารถเพาะเมล็ดตัวอย่างดั้งเดิมโดยตรงปล่อยวัสดุลงบนส่วนหนึ่งของวุ้นและจากนั้นจะเกิดการสะสมโดยการอ่อนเพลีย.

ในกรณีที่ใช้น้ำซุปที่ผ่านการเสริมคุณค่าให้ผ่านน้ำซุปเซเลไนต์และแม่สุกรด้วย drigalski spatula.

ฟักไข่ที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในแอโรบิก.

โปรดทราบว่าปริมาณกรัมที่จะชั่งน้ำหนักและค่า pH สุดท้ายของสื่ออาจแตกต่างกันไปตามบ้านเชิงพาณิชย์แห่งหนึ่งไปยังอีกแห่งหนึ่ง แผ่นฐานของสื่อนำตัวบ่งชี้สำหรับการเตรียมเสมอ.

ใช้

มันถูกใช้บ่อยในการวิเคราะห์วัฒนธรรมของอุจจาระและในการศึกษาทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างน้ำที่เหลือ, น้ำดื่มและอาหาร.

บ่อยครั้งที่มีการเตรียมเพลทสองชั้นไว้ที่หนึ่งด้านหนึ่งของเชื้อ Salmonella-Shigella และอีกด้านหนึ่งของ XLD agar.

ข้อ จำกัด

-บางสายพันธุ์ของชิเกลล่าไม่เติบโตในสื่อนี้ ดังนั้นจึงไม่แนะนำสำหรับการแยกหลักของพืชชนิดนี้.

-ไม่ใช่ทุกอาณานิคมชัดเจนที่มีจุดศูนย์กลางสีดำบ่งบอกถึงเชื้อ Salmonella; การทดสอบทางชีวเคมีจะต้องดำเนินการเพื่อระบุตัวตนที่ถูกต้องเนื่องจากอาณานิคมของสายพันธุ์โพรทูสบางสายพันธุ์นั้นแยกไม่ออกจากเชื้อ Salmonella.

-สื่อที่ถูกคายน้ำควรระวังการสัมผัสกับสิ่งแวดล้อมเนื่องจากเป็นอุ้มน้ำมาก ดังนั้นจึงต้องเก็บไว้ในที่แห้งและสภาพแวดล้อมที่ดี เปิดเป็นระยะเวลาสั้น ๆ.

-เมื่อเวลาผ่านไปน้ำดีเกลือในสื่อสามารถตกตะกอนสร้างภาพคล้ายกับด้านใน agar แต่ไม่ส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์.

-บางสายพันธุ์ของชิเกลล่าสามารถหมักแลคโตสได้ช้า.

การควบคุมคุณภาพ

เพื่อพิสูจน์ว่าสื่อทำงานได้อย่างถูกต้องจะแนะนำให้ปลูกหรือรู้จักสายพันธุ์ควบคุมที่ผ่านการรับรองและสังเกตว่าการเจริญเติบโตตรงตามลักษณะที่คาดหวัง.

เพื่อจุดประสงค์นี้สายพันธุ์ของ เชื้อ E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium หรือ Enterococcus faecalis.

ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือ:

Escherichia coli --อาณานิคมสีชมพูนูน.

Enterobacter และ Klebsiella- อาณานิคมขนาดใหญ่และเยื่อเมือกสีแดงหรือสีชมพู.

Shigella flexneri --อาณานิคมแบนชัดเจนหรือไม่มีสี.

Salmonella typhimurium - อาณานิคมที่ไม่มีสีมีจุดศูนย์กลางสีดำ.

Enterococcus faecalis-- การยับยั้งทั้งหมด.

การอ้างอิง

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella วุ้น 2552 มีจำหน่ายที่: f-soria.es
2. ห้องปฏิบัติการ BD BD Salmonella-Shigella Agar 2013 จำหน่ายได้ที่: bd.com
3. ห้องปฏิบัติการ Britania Salmonella-Shigella Agar 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com
4. การวินิจฉัย Valtek Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010 วางจำหน่ายแล้วที่: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด บรรณาธิการ Panamericana S.A. อาร์เจนตินา.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา วันที่ 5 บรรณาธิการ Panamericana S.A. อาร์เจนตินา.