หุ้น:
มูลนิธิเกลือและมานิทอลการเตรียมและการใช้งาน
เกลือวุ้นและแมนนิทอล หรือ mannitol เค็มเป็นสื่อวัฒนธรรมที่มั่นคงเลือกและแตกต่างกัน มันถูกสร้างขึ้นโดยแชปแมนเพื่อแยกเชื้อก่อโรคแกรมบวกโดยเฉพาะ เชื้อ Staphylococcus aureus.
อย่างไรก็ตามมันยังมีประโยชน์ในการแยก Staphylococcus epidermidis, ที่บางครั้งสามารถนำเสนอเป็นเชื้อโรคฉวยโอกาสและ Staphylococcus saprophyticus, รู้จักเชื้อโรคทางเดินปัสสาวะในหมู่สายพันธุ์อื่น ๆ.
Enterococcus บางตัวสามารถเจริญเติบโตได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อนี้เช่นเดียวกับเชื้อแบคทีเรียที่สร้างสปอร์ของแกรมบวก.
สื่อนี้มีประโยชน์มากในการวิเคราะห์ตัวอย่างทางคลินิก แต่ยังใช้ในการศึกษาทางจุลชีววิทยาของอาหารและในการควบคุมคุณภาพของผลิตภัณฑ์อุตสาหกรรมเช่นเครื่องสำอางยารักษาโรคและอื่น ๆ.
วุ้นแมนนิทอลเค็มประกอบด้วยสารสกัดและเพปโทนเนื้อวัวไตรทินินแมนนิทอลโซเดียมคลอไรด์ฟีนอลเรดและวุ้น.
ดัชนี
- 1 มูลนิธิ
- 2 การเตรียมการ
- 3 ใช้
- 4 การควบคุมคุณภาพ
- 5 ข้อพิจารณาสุดท้าย
- 6 อ้างอิง
มูลนิธิ
แมนนิทอลอาการ์เป็นตัวเลือกที่ต้องขอบคุณเกลือที่มีความเข้มข้นสูง ความเค็มทำหน้าที่เป็นสารยับยั้งและป้องกันการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมลบ.
นอกจากนี้ยังแตกต่างกันเนื่องจากมีแมนนิทอลคาร์โบไฮเดรตและตัวบ่งชี้ค่า pH แดงฟีนอล จากนี้แบคทีเรียที่มีความสามารถในการหมักแมนนิทอลจะผลิตกรดทำให้กรดเป็นสื่อกลางเปลี่ยนโคโลนีและสีเหลืองขนาดกลาง.
ในอีกทางหนึ่งอาณานิคมที่ไม่หมักแมนนิทอลเติบโตในอาหารเลี้ยงด้วยอาหารที่ได้รับจากสารสกัดและเปปตัสของเนื้อสัตว์และtripteína จากนั้นแบคทีเรียจะแยกคาร์บอนไนโตรเจนวิตามินและแร่ธาตุที่จำเป็นต่อการเจริญเติบโต.
อาณานิคมในกรณีนี้อาจอ่อนหรือชมพูเข้มและสื่อยังคงมีสีเดียวกันหรือเปลี่ยนเป็นสีแดงม่วง.
วุ้นเป็นสารที่ให้ความสม่ำเสมอกับตัวกลาง.
การจัดเตรียม
ในการเตรียมวุ้นแมนนิทอลหนึ่งลิตรจะต้องชั่งน้ำหนักและละลาย 111 กรัมในอาหารสำเร็จรูปเพื่อการพาณิชย์และละลายในน้ำกลั่น 1,000 มิลลิลิตรโดยใช้ฟิโอล่า.
ความร้อนถูกนำไปใช้โดยการลบสื่อบ่อย ๆ เพื่อปรับปรุงกระบวนการละลาย ปล่อยให้เดือดสักครู่.
วาง Fiola ในหม้อนึ่งความดันที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที.
เมื่อสิ้นสุดเวลา Fiola จะถูกนำออกจากหม้อนึ่งความร้อนอนุญาตให้ยืนและเสิร์ฟระหว่าง 15 ถึง 20 มล. สำหรับจานเพาะเชื้อที่ปลอดเชื้อเมื่ออุณหภูมิอยู่ที่ประมาณ 50 ถึง 55 ° C.
ได้รับอนุญาตให้แข็งจัดเรียงในรูปแบบคว่ำใน plaqueros และเก็บในตู้เย็นจนกว่าจะใช้ ก่อนที่จะปลูกตัวอย่างคุณต้องรอให้แผ่นรับอุณหภูมิของสภาพแวดล้อม.
แผ่นจะถูกหว่านโดย striation หรือโดยการหว่านบนพื้นผิวด้วยไม้พาย drigalski ค่า pH สุดท้ายของสื่อที่เตรียมไว้ควรเป็น 7.4 ± 0.2
สีของตัวกลางที่ถูกคายน้ำคือสีเบจอ่อนและสีของตัวกลางที่เตรียมไว้คือสีแดงส้ม.
การใช้งาน
เนื่องจากมีความสามารถในการคัดเลือกสูงสื่อนี้จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการปลูกพืชตัวอย่างที่มีพืชผสมซึ่งเราต้องการค้นหาการมีอยู่ของมัน เชื้อ Staphylococcus aureus, เป็นเชื้อโรคหลักของพืชชนิดนี้.
ในแง่นี้หนึ่งในการใช้งานบ่อยที่สุดคือในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างของสารหลั่งคอหอยและน้ำมูกไหลโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการตรวจสอบผู้ให้บริการที่ไม่มีอาการของ S. aureus.
บางประเทศได้ดำเนินการวิเคราะห์นี้เป็นข้อกำหนดที่จำเป็นสำหรับผู้ที่ต้องการทำงานเป็นผู้ขายอาหาร.
การควบคุมนี้จะป้องกันการจ้างงานของผู้ที่เป็นพาหะของ S. aureus, จึงหลีกเลี่ยงอาหารเป็นพิษมาก, เนื่องจากการบริโภคอาหารที่ปนเปื้อนด้วยเชื้อ Staphylococcal enterotoxin.
นอกจากนี้ยังสามารถรวมอยู่ในการเพาะเชื้อบาดแผล, วัฒนธรรมเลือด, น้ำไขสันหลัง, ล้างหลอดลมและอื่น ๆ.
mannitol agar ที่มีประโยชน์สำหรับการแยกโคโลนีของวัฒนธรรมปัสสาวะจาก CLED agar หรือ agar เลือดซึ่งกรัมได้เปิดเผย cocci กรัมบวกในกลุ่ม.
นอกจากนี้ยังสามารถใช้ในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหารน้ำดื่มดินและการใช้งานอื่น ๆ.
การควบคุมคุณภาพ
เมื่อเตรียมชุดของแผ่นที่มีวุ้นแมนนิทอลเค็มแล้วก็จะแนะนำให้ดำเนินการควบคุมคุณภาพ สายพันธุ์ควบคุมถูกหว่านเพื่อแสดงว่ามีการเติบโตหรือไม่.
ในฐานะที่เป็นบวกควบคุมสายพันธุ์ที่รู้จักกันของ เชื้อ Staphylococcus aureus. มันจะต้องเติบโตอย่างน่าพอใจโดยการพัฒนาอาณานิคมสีเหลืองและสื่อก็จะกลายเป็นสีเดียวกัน.
ในทำนองเดียวกันจะสะดวกในการรวมสายพันธุ์ที่รู้จัก Staphylococcus epidermidis. มันจะต้องเติบโตขึ้นอย่างน่าพอใจโดยการพัฒนาอาณานิคมสีชมพูและสื่อยังคงมีสีเดียวกันหรือเข้มขึ้นในสีชมพูที่แข็งแรงกว่า.
ในฐานะที่เป็นการควบคุมเชิงลบจะใช้สายพันธุ์ที่ไม่ควรเติบโตในสื่อนี้ ตัวอย่างเช่นคุณสามารถปลูกสายพันธุ์ที่รู้จัก Escherichia coli หรือ Klebsiella pneumoniae. ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือการยับยั้งอย่างสมบูรณ์นั่นคือไม่มีการเติบโต.
นอกจากนี้จานที่ไม่มีการฉีดวัคซีนควรได้รับการบ่ม ในนั้นไม่ควรมีการเจริญเติบโตไม่มีการเปลี่ยนสี.
มันเป็นสิ่งสำคัญที่แผ่นไม่ได้ใช้ถ้ามีข้อบ่งชี้ของการเสื่อมสภาพเช่นการปนเปื้อนการคายน้ำการเปลี่ยนสีหมู่คนอื่น ๆ.
ข้อพิจารณาสุดท้าย
เมื่อใช้สื่อวุ้นแมนนิทอลเกลือคุณต้องคำนึงถึงประเด็นสำคัญบางประการด้วย:
-การได้รับการเติบโตของอาณานิคมสีเหลืองไม่ได้บ่งบอกว่ามันเป็น เชื้อ Staphylococcus aureus. ต้องจำไว้ว่า Enterococcus บางสายพันธุ์สามารถเจริญเติบโตได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อแมนนิทอลนี้เช่นเดียวกับบาซิลลัสที่สร้างสปอร์ของแบคทีเรียแกรมบวก.
ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญที่จะทำการทดสอบแกรมให้กับโคโลนีและการทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยา.
-ในทางกลับกันก็ต้องถือว่า Staphylococcus สายพันธุ์อื่นนั้นแตกต่างจาก aureus พวกเขายังสามารถหมักแมนนิทอลได้อีกด้วย ดังนั้นจึงเป็นเรื่องสำคัญที่จะต้องทำการเพาะเลี้ยงโคโลนีให้เป็นน้ำซุปที่มีสารอาหารเพื่อนำมาจากที่นั่นและทำการทดสอบ coagulase.
ในบรรดาสปีชีส์ของ Staphylococcus ที่มีความสำคัญทางคลินิกสำหรับการหมักแมนนิทอลคือ: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ยูเรียลิทัสเอสเอส, S. xylosus, S. cohnii ssp ยูเรียติก, ท่ามกลางคนอื่น ๆ.
บางคนอาจให้ปฏิกิริยาแบบแปรเปลี่ยนนั่นคือบางครั้งเป็นบวกและลบในบางครั้ง บ้างก็คือ S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, ท่ามกลางคนอื่น ๆ.
-ไม่แนะนำให้นำอาณานิคมโดยตรงจาก mannitol agar เพื่อทำการทดสอบ coagulase เนื่องจากความเข้มข้นของเกลือที่สูงของตัวกลางสามารถรบกวนผลที่ได้.
-ในที่สุดก็จะแนะนำให้ฟักแผ่นที่มีเมล็ดแมนนิทอลเค็มนานถึง 48 ชั่วโมงเนื่องจากความจริงที่ว่าบางสายพันธุ์ของ S. aureus พวกเขาสามารถหมักแมนนิทอลช้าๆแม้ว่าจะไม่บ่อยมากนัก.
การอ้างอิง
- ห้องปฏิบัติการ Britania วุ้นเส้นแมนนิทอล 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com
- "เกลือ Mannitol วุ้น". Wikipedia, สารานุกรมฟรี. 31 ต.ค. 2018, 19:08 UTC 17 ม.ค. 2019, 20:55, ดูได้ที่: en.wikipedia.org.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินา, Panamericana บรรณาธิการ.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา Panamericana S.A บทบรรณาธิการ
- BD Laboratories BD Mannitol Salt Agar 2013 จำหน่ายได้ที่: bd.com.