มูลนิธิวุ้นที่มีคุณค่าทางโภชนาการการเตรียมและการใช้

วุ้นมีคุณค่าทางโภชนาการ มันเป็นสื่อวัฒนธรรมที่มั่นคงแบบไม่เลือกและไม่แตกต่างกัน ในสภาพแวดล้อมนี้เติบโตแบคทีเรียทุกชนิดที่ไม่ต้องการจากมุมมองทางโภชนาการ.

มันเป็นวิธีที่ง่ายและแม้จะมีชื่อของมันมีคุณค่าทางโภชนาการที่ต่ำกว่าเมื่อเทียบกับสื่อที่คล้ายกันอื่น ๆ เช่น agar สมองสมองแช่ agar หรือ trypticase ถั่วเหลืองวุ้น.

มีประโยชน์ในห้องปฏิบัติการแตกต่างกันมาก ส่วนใหญ่ใช้สำหรับวัฒนธรรมย่อยของสายพันธุ์การบำรุงรักษาสายพันธุ์นับโคโลนีเป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียม agar เลือดหมู่คนอื่น ๆ.

เช่นเดียวกันเนื่องจากสีเบจอ่อนการผลิตเม็ดสีที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรียบางสายพันธุ์เช่นเม็ดสีเขียวของ Pseudomonas aeruginosa, เม็ดสีแดงอิฐที่ผลิตโดย Serratia marcescens ที่อุณหภูมิห้องเม็ดสีเหลืองทองของ เชื้อ Staphylococcus aureus, ท่ามกลางคนอื่น ๆ.

นอกจากนี้ยังเป็นหนึ่งในสื่อการเติบโตที่ประหยัดที่สุดที่พบในตลาด.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
• 2 องค์ประกอบ
• 3 การเตรียมการ
• 4 ใช้
  • 4.1 เป็นพื้นฐานสำหรับการเตรียม agar เลือด
  • 4.2 กระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์
  • 4.3 การบำรุงรักษาสายพันธุ์
  • 4.4 การนับอาณานิคม
  • 4.5 การดำเนินการทดสอบวินิจฉัย
  • 4.6 การคืนสภาพของน้ำเกลือแอโรบิคที่พักผ่อนหย่อนใจ mesophilic (ชายหาด)
• 5 อ้างอิง

มูลนิธิ

ดังที่ได้กล่าวไปแล้วมันเป็นวิธีที่ง่ายมากที่มีพื้นฐานมาจากการให้สารอาหารเพื่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรียโดยไม่มีข้อ จำกัด และไม่มีปฏิกิริยาที่ซับซ้อนในการตีความ.

เนื่องจากสื่อมีความโปร่งแสงจึงเหมาะสำหรับการนับอาณานิคมโดยวิธีการหว่านโดยความลึก.

ส่วนประกอบ

มันเป็นส่วนใหญ่ประกอบด้วยสารสกัดจากเนื้อสัตว์หรือสารสกัดจากยีสต์, peptones หรือย่อยตับอ่อนเจลาติน, วุ้นวุ้น, โซเดียมคลอไรด์และน้ำกลั่น.

สารสกัดจากเนื้อสัตว์หรือยีสต์และ peptones แสดงถึงแหล่งที่มาของคาร์บอนและแร่ธาตุที่จำเป็น (ไนโตรเจนฟอสฟอรัสและกำมะถัน) ซึ่งแบคทีเรียจะใช้เป็นแหล่งพลังงานและปัจจัยการเจริญเติบโต.

ในทำนองเดียวกัน agar-agar เป็นพื้นฐานของสื่อที่กำลังเติบโตทั้งหมดแทนที่เจลาตินซึ่งเป็นสารประกอบพื้นฐานตัวแรกที่ Robert Koch ใช้เพื่อให้ความมั่นคงของสื่อของเขามั่นคง.

Agar เป็นโพลีแซคคาไรด์ที่ประกอบด้วยกาแลคโตสกาแลคโตมันนัน agarose และ agaropectin มันตั้งที่ 40 ° C และละลายใกล้ถึง 100 ° C.

สำหรับส่วนของโซเดียมคลอไรด์นั้นจะให้ออสโมลาริตี้ที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาแบคทีเรีย.

ในที่สุดน้ำจะทำหน้าที่ให้ความชุ่มชื้นและละลายสารประกอบที่เป็นกรด ควรใช้น้ำกลั่นที่มีค่า pH เป็นกลาง ไม่ควรใช้น้ำประปาเพราะมันมีแคลเซียมและแมกนีเซียมที่สามารถทำปฏิกิริยากับฟอสเฟตในตัวกลางและเกลือที่ไม่ละลายน้ำ.

การจัดเตรียม

สำหรับวุ้นที่มีคุณค่าทางอาหารหนึ่งลิตรควรชั่งน้ำหนักอาหารที่มีน้ำ 31 กรัม มันถูกวางไว้ใน Fiola และละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร หลังจากพัก 5 นาทีผ่านความร้อนจากแหล่งความร้อนและผสมอย่างต่อเนื่องจนเดือดประมาณ 1 หรือ 2 นาที.

จากนั้นวาง fiola ลงในหม้อนึ่งความดันและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 20 นาที.

ในตอนท้ายของเวลานั้นจะถูกลบออกจากหม้อนึ่งความดันและเสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อที่ปลอดเชื้อโดยใช้เครื่องดูดควันไหลลามินาร์หรือเครื่องเผาแผดเผา Bunsen.

หากจาน Petri เป็นแบบใช้แล้วทิ้ง (พลาสติก) ควรกระจายสื่อเมื่อวุ้นมีอุณหภูมิประมาณ 50 ° C เพื่อป้องกันไม่ให้อาหารเสียรูปเนื่องจากความร้อนสูงเกินไป.

อนุญาตให้แข็งตัวและเก็บในที่ยึดแผ่นคว่ำและแช่เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 ° C จนกว่าจะใช้.

ต้องชุบก่อนที่จะถูกหว่าน ไม่ควรใช้แผ่นเจลบำรุงผิวหากมีการปนเปื้อนหรืออบแห้ง.

ควรปรับค่าความเป็นกรด - ด่างของตัวกลางที่เตรียมไว้เป็น 7.3 ± 0.2.

การใช้งาน

มันเป็นสื่อวัฒนธรรมที่ง่ายที่สุดที่ใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา สูตรนี้ยอดเยี่ยมสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ไม่ต้องการ.

การใช้งานหลักมีการอธิบายด้านล่าง:

เป็นฐานในการจัดทำอาหารวุ้น

สื่อนี้บางครั้งใช้เป็นฐานในการเตรียมวุ้นอย่างไรก็ตามมันไม่ได้เป็นฐานที่ใช้กันมากที่สุด.

กระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์

สื่อการเพาะเลี้ยงนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการกระตุ้นการสร้างสปอร์ของแบคทีเรียที่สร้างสปอร์เช่น บาซิลลัส sp.

เมื่อต้องการทำเช่นนี้สายพันธุ์ของสกุลจะถูกหว่าน บาซิลลัส และบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 ° C ในแอโรบิโอซิส เมื่ออาณานิคมเติบโตขึ้นจานจะถูกทำให้เครียดด้วยอุณหภูมินั่นคืออุณหภูมิของเตาเพิ่มขึ้นเป็น 44 ° C และปล่อยทิ้งไว้ 24 ชั่วโมงหรือมากกว่านั้นจะถูกนำไปใส่ในตู้เย็นเป็นเวลา 24 ชั่วโมง.

ในตอนท้ายของการเพาะปลูกวัฒนธรรมจะขยายและเปื้อนด้วยคราบแกรมหรือรอยเปื้อนสปอร์ของ Shaeffer-Fulton ในพวกเขาจะพบแบคทีเรียที่มีเอนโดสปอร์ (สปอร์ภายในบาซิลลัส) และสปอร์นอก (สปอร์นอกบาซิลลัส).

การบำรุงรักษาสายพันธุ์

ห้องปฏิบัติการวิจัยบางแห่งหรือห้องปฏิบัติการสนับสนุนการสอนของมหาวิทยาลัยจำเป็นต้องรักษาแบคทีเรียที่มีความสำคัญทางคลินิกให้ได้นานที่สุดเพื่อใช้ธนาคารแบคทีเรีย (แบคทีโอเธโอ) สำหรับงานวิจัยหรือเพื่อเตรียมการสอน นักเรียนจะได้เรียนรู้ที่จะจัดการและจำแนกจุลินทรีย์เหล่านี้.

วุ้นที่มีคุณค่าทางอาหารรวมถึงวุ้นหัวใจแช่หัวใจสามารถนำมาใช้เพื่อการนี้ได้ วุ้นถูกเตรียมเทลงในหลอดที่ทำด้วยเบเกลไลต์แล้วเอียงบนฐานในลักษณะที่วุ้นแข็งตัวกลายเป็นบล็อกที่ด้านล่างและมุมเอียงบนพื้นผิว (ยอดขลุ่ย).

แต่ละหลอดจะมีป้ายกำกับโดยวางชื่อของแบคทีเรียที่จะปลูกและวันที่ บนฝาแต่ละแบคทีเรียจะถูกปลูกและบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเมื่ออาณานิคมเติบโตหลอดจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง.

แบคทีเรียต้องได้รับการต่ออายุจาก 1 ถึง 3 เดือนเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนและการขาดน้ำของอาหารและการตายของแบคทีเรีย.

วิธีนี้จะรักษาได้เฉพาะแบคทีเรียที่ไม่ต้องการ.

การนับหมู่

แม้ว่าจะมีวิธีการพิเศษสำหรับการนับอาณานิคมเช่นวุ้นนับมาตรฐานวุ้นวุ้นสามารถนำมาใช้เพื่อการนี้ได้เช่นกันโดยการหว่านลงบนพื้นผิวด้วยไม้พาย drigalski หรือลึก ดังนั้นจึงมีประโยชน์มากในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหารและน้ำ.

การดำเนินการทดสอบวินิจฉัย

เนื่องจากเป็นสื่อที่ไม่มีเลือดหรือสารเติมแต่งอื่น ๆ จึงเหมาะที่จะใช้อาณานิคมที่ปลูกในอาหารนี้เพื่อทำการทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยา.

ในทำนองเดียวกันเนื่องจากมีสีใสจึงมีการระบุให้ทำการทดสอบ oxidase โดยตรงบนพื้นที่ของวุ้นที่เพาะเมล็ดโดยไม่มีการรบกวน.

การกู้คืนของน้ำเกลือแอโรบิกที่พักผ่อนหย่อนใจ mesophilic (ชายหาด)

สารอาหารที่เตรียมจากน้ำทะเล 10% มีประโยชน์สำหรับการประเมิน aerobes ของ mesophilic ในน่านน้ำชายหาด.

ด้วยวิธีนี้เราสามารถชื่นชมระดับการปนเปื้อนที่แท้จริงที่น้ำมีกับจุลินทรีย์เหล่านี้เนื่องจากในตัวอย่างประเภทนี้ผลลัพธ์จะซ้อนทับกันเมื่อใช้สื่อวัฒนธรรมที่จัดทำในลักษณะปกติ.

สิ่งนี้แสดงให้เห็นโดย Cortez และคณะ ในปี 2013 ในรายงานการวิจัย.

สิ่งนี้สามารถอธิบายได้เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงอย่างฉับพลันที่แบคทีเรียได้รับเมื่อไปจากสภาพแวดล้อมที่มีน้ำเกลือมากไปเป็นสภาพแวดล้อมที่มีเกลือต่ำดังนั้นจุลินทรีย์จะเข้าสู่สภาวะง่วงที่พวกมันทำงานได้ แต่ไม่สามารถเพาะปลูกได้.

การอ้างอิง

1. "วุ้นมีคุณค่าทางโภชนาการ" Wikipedia, สารานุกรมฟรี. 13 ก.ย. 2559, 20:33 UTC 29 ธันวาคม 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา Panamericana S.A บทบรรณาธิการ.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินา, Panamericana บรรณาธิการ.
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. ผลของสื่อวัฒนธรรมที่เตรียมด้วยน้ำทะเลต่อตัวชี้วัดสุขภาพในน่านน้ำทะเลของสปา Chichiriviche, Falcón state, เวเนซุเอลา. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M และ Cardoso M. คุณภาพทางจุลชีววิทยาของน้ำสำหรับการผสมในปริมาณสำหรับ Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994) จุลชีววิทยาคลินิกภาคปฏิบัติ มหาวิทยาลัยกาดิซรุ่นที่ 2 บริการสิ่งพิมพ์ UCA.