หุ้น:
มูลนิธิ MacConkey Agar การเตรียมและการใช้งาน
MacConkey agar เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่สามารถแยกเชื้อแบคทีเรียแกรมลบแบบเอกสิทธิ์เฉพาะบุคคลได้ ด้วยเหตุนี้มันจึงเป็นสื่อที่เลือกสรรและยังช่วยแยกแยะความแตกต่างระหว่างการหมักและบาซิลลัสที่ไม่ผ่านการหมักของแลคโตสซึ่งทำให้เป็นสื่อกลางที่แตกต่างกัน มันเป็นหนึ่งในสื่อวัฒนธรรมที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา.
สื่อนี้ใช้เป็นหลักในการแยกแบคทีเรียแกรมลบของแกรมที่เป็นของครอบครัว Enterobacteriaceae, รวมถึงสายพันธุ์ฉวยโอกาสและ enteropathogenic.
นอกจากนี้ยังสามารถใช้เพื่อแยกบาซิลลัสลำไส้อื่น ๆ ที่อาศัยอยู่ในทางเดินอาหาร แต่ไม่ได้อยู่ใน Enterobacteriaceae, ในขณะที่ Aeromonas sp, Plesiomonas sp, ท่ามกลางคนอื่น ๆ.
ในที่สุดมันสามารถแยกแบคทีเรียแกรมลบอื่น ๆ ที่ไม่ผ่านกระบวนการหมักที่พบในสภาพแวดล้อมน้ำหรือดิน แต่บางครั้งอาจเป็นเชื้อก่อโรคฉวยโอกาสเช่น Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, อัลคาไลน์ sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, ท่ามกลางคนอื่น ๆ.
ดัชนี
- 1 มูลนิธิ
- 1.1 MacConkey Agar
- 2 การเตรียมการ
- 3 การใช้งานทั่วไปของ MacConkey agar
- 4 สายพันธุ์อื่น ๆ ของ MacConkey agar
- 4.1 MacConkey agar พร้อมซอร์บิทอล
- 4.2 MacConkey Agar ที่ไม่มีคริสตัลม่วงหรือเกลือ
- 4.3 MacConkey agar พร้อม cefoperazone
- 4.4 MacConkey Agar จัดทำขึ้นด้วยน้ำทะเล 10% v / v
- 5 อ้างอิง
มูลนิธิ
MacConkey Agar
รากฐานของสื่อนี้สามารถอธิบายได้ผ่านคำอธิบายของส่วนประกอบเพราะแต่ละคนมีจุดประสงค์ที่กำหนดคุณสมบัติของมัน.
เกลือน้ำดีและคริสตัลสีม่วง
ในแง่นี้วุ้น MacConkey มีองค์ประกอบที่ซับซ้อน ก่อนอื่นมันมีเกลือน้ำดีและคริสตัลสีม่วง.
องค์ประกอบเหล่านี้มีหน้าที่ยับยั้งการเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียแกรมลบที่เรียกร้อง ในทางกลับกันมันก็สนับสนุนการพัฒนาของแบคทีเรียแกรมลบแกรมที่ไม่ได้รับผลกระทบจากสารเหล่านี้ นั่นคือเหตุผลที่มันเป็นสื่อที่เลือก.
มีการกล่าวกันว่าเลือกได้เล็กน้อยเมื่อเทียบกับสื่ออื่นที่ยับยั้งการเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่.
มันเลือกมากสำหรับประเภทที่เฉพาะเจาะจงเช่น TCBS วุ้นสำหรับการแยก Vibrio cholerae และอื่น ๆ ที่คล้ายคลึงกันชนิด halophilic และ alkalophilic.
Peptones, polypectones และแลคโตส
มีสารที่ให้สารอาหารที่จำเป็นต่อจุลินทรีย์ที่พัฒนาในสื่อนี้เช่น peptones, polypectones และแลคโตส.
แลคโตสเป็นจุดสำคัญสำหรับสื่อที่จะเป็นสื่อกลางที่แตกต่างเพราะจุลินทรีย์ที่มีความสามารถในการหมักแลคโตสจะพัฒนาโคโลนีสีชมพูที่แข็งแกร่ง.
แบคทีเรียบางชนิดสามารถหมักแลคโตสช้าหรืออ่อนพัฒนาโคโลนีสีชมพูอ่อนและยังคงแลคโตสในเชิงบวก.
ผู้ที่ไม่หมักแลคโตสใช้ peptones เป็นแหล่งพลังงานผลิตแอมโมเนียทำให้เป็นด่าง ดังนั้นอาณานิคมที่มานั้นไม่มีสีหรือโปร่งใส.
ตัวบ่งชี้ PH
การเปลี่ยนสีสามารถทำได้ผ่านสารประกอบที่จำเป็นอื่น ๆ ที่มีวุ้น MacConkey สารประกอบนี้คือตัวบ่งชี้ค่า pH ซึ่งในกรณีนี้คือสีแดงที่เป็นกลาง.
การหมักแลคโตสสร้างการผลิตกรดผสม พวกเขาทำให้เป็นกรดสื่อที่ pH ต่ำกว่า 6.8.
ทำให้ตัวบ่งชี้ค่า pH เปลี่ยนเป็นสีชมพูเข้ม ความเข้มของสีอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับค่า pH สุดท้าย.
น้ำกลั่นโซเดียมคลอไรด์และวุ้น
ในทางตรงกันข้ามมันมีน้ำกลั่นและโซเดียมคลอไรด์ที่ให้ความชุ่มชื้นและสมดุลออสโมติกกับสื่อ ในที่สุดสื่อก็มี agar ซึ่งเป็นฐานที่ให้ความมั่นคงของตัวกลางที่เป็นของแข็ง.
อาหารเลี้ยงเชื้อ MacConkey ที่เตรียมไว้จะต้องมีการปรับค่า pH สุดท้ายเป็น 7.1 ± 0.2.
การจัดเตรียม
สำหรับวุ้น MacConkey หนึ่งลิตรควรชั่งน้ำหนักสื่อที่ถูกอบแห้ง 50 กรัมจากนั้นนำไปวางใน Fiola และละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร หลังจากพัก 10 นาทีจะได้รับความร้อนโดยผสมอย่างต่อเนื่องจนเดือดเป็นเวลา 1 นาที.
จากนั้นวาง fiola ในหม้อนึ่งความดันและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 20 นาที ในตอนท้ายของเวลามันจะถูกลบออกจากหม้อนึ่งความดันและอนุญาตให้เย็นที่อุณหภูมิ 45 ° C จากนั้นเสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อปลอดเชื้อภายในเครื่องดูดควันไหลแบบราบเรียบหรือหน้าเตาเผาแผดเผา.
อนุญาตให้แข็งตัวและเก็บในที่ยึดแผ่นคว่ำและแช่เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 ° C จนกว่าจะใช้.
เพื่อให้ได้มาซึ่ง MacConkey agar ที่ยับยั้งเอฟเฟ็กต์ swarning ที่เกิดจาก Proteus สกุลนั้นจะใช้ agConce macConkey เกลือต่ำ.
การใช้งานของ MacConkey ทั่วไป agar
MacConkey agar นั้นรวมอยู่ในสื่อทางวัฒนธรรมทุกชุดที่จัดไว้สำหรับการหว่านตัวอย่างทางคลินิกที่ได้รับในห้องปฏิบัติการ นอกจากนี้ยังมีประโยชน์ในจุลชีววิทยาอาหารและจุลชีววิทยาสิ่งแวดล้อม.
ความหลากหลายของแบคทีเรียแกรมลบกรัมที่เติบโตในสื่อนี้แสดงลักษณะฟีโนไทป์ที่ช่วยในการวินิจฉัยสันนิษฐานของสายพันธุ์ในคำถาม ตัวอย่างเช่นขนาดสีความสม่ำเสมอและกลิ่นของอาณานิคมเป็นลักษณะบางอย่างที่สามารถเป็นแนวทางได้.
ในสภาพแวดล้อมนี้สายพันธุ์ของ Escherichia coli, Klebsiella sp และ Enterobacter sp สร้างอาณานิคมสีชมพูที่แข็งแกร่งล้อมรอบด้วยพื้นที่ของน้ำดีที่ตกตะกอน.
ในขณะที่แบคทีเรีย Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp และ Hafnia sp สามารถปรากฏได้โดยไม่มีสีหลังจาก 24 ชั่วโมงหรือสีชมพูอ่อนใน 24 -48 ชั่วโมง.
เช่นเดียวกัน Genera Proteus, Edwadsiella, Salmonella และ Shigella สร้างอาณานิคมที่ไม่มีสีหรือโปร่งใส.
ตัวแปรอื่น ๆ ของ MacConkey agar
มีสายพันธุ์อื่น ๆ ของ MacConkey agar ที่มีวัตถุประสงค์เฉพาะ ถัดไปพวกเขาจะกล่าวถึง:
MacConkey agar พร้อมซอร์บิทอล
สื่อนี้ถูกออกแบบมาเพื่อแยกความเครียด enteropathogenic (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) ของสายพันธุ์ที่เหลือ Escherichia coli.
สื่อนี้เปลี่ยนแลคโตสคาร์โบไฮเดรตสำหรับซอร์บิทอล สายพันธุ์ของ อี. โคไล enterohaemorrhagic O157: H7 แตกต่างจากส่วนที่เหลือเพราะพวกเขาไม่ได้หมักซอร์บิทอลและดังนั้นจึงได้รับอาณานิคมโปร่งใส แต่ส่วนที่เหลือของสายพันธุ์ อี. โคไล ถ้าพวกเขาหมักซอร์บิทอลและอาณานิคมก็มีสีชมพูเข้ม.
MacConkey Agar ที่ไม่มีคริสตัลม่วงหรือเกลือ
วุ้นนี้แตกต่างจากวุ้น MacConkey แบบคลาสสิกเนื่องจากไม่มีสีม่วงใสแบคทีเรียแกรมบวกสามารถเจริญเติบโตได้.
ในทางกลับกันการไม่มีเกลือยับยั้งการปรากฏตัวของการจับกลุ่มบนวุ้นที่ผลิตโดยแบคทีเรียบาซิลลัสบางชนิดเช่นพวกสกุล Proteus, และอำนวยความสะดวกในการแยกแบคทีเรียทั้งหมดที่มีอยู่รวมถึงแบคทีเรียแกรมบวก.
MacConkey agar พร้อม cefoperazone
ตัวแปรของ MacConkey agar นี้ถูกออกแบบมาเพื่อแยกในตอนแรก Laribacter hongkongensis และต่อมาพวกเขาก็ตระหนักว่ามันมีประโยชน์สำหรับการแยก Arcobacter butzleriทั้งสองจะมีค่าลบ Gram bacilli ที่ทนต่อเซเฟอราโซน.
แบคทีเรียเหล่านี้เพิ่งถูกเชื่อมโยงเป็นสาเหตุของโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบและท้องเสียที่เกิดขึ้นในคนเอเชียและยุโรป.
ยาปฏิชีวนะช่วยยับยั้งการติดเชื้อของระบบทางเดินอาหารซึ่งเป็นประโยชน์ต่อการพัฒนาของแบคทีเรียเหล่านี้ทำให้ไม่สามารถสังเกตเห็นได้เนื่องจากต้องใช้เวลา 72 ชั่วโมงในการเจริญเติบโต.
MacConkey Agar จัดทำขึ้นด้วยน้ำทะเล 10% v / v
ตัวแปรนี้มีประโยชน์สำหรับการประเมินตัวชี้วัดสุขภาพของแบคทีเรียจากการปนเปื้อนของอุจจาระรวมถึงโคลิฟอร์มทั้งหมดและโคลิฟอร์มของอุจจาระในน้ำเค็มนันทนาการ (ชายหาดและอ่าว).
Cortez et al. 2013 แสดงให้เห็นว่าสื่อที่เตรียมด้วยวิธีนี้ช่วยเพิ่มการฟื้นตัวของจุลินทรีย์เหล่านี้ในสภาพแวดล้อมที่เป็นน้ำเค็มเมื่อเทียบกับการใช้งานของ MacConkey agar ที่เตรียมด้วยน้ำกลั่น.
นี่เป็นเพราะสื่อที่ถูกดัดแปลงช่วยกระตุ้นการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่อยู่ในสภาพพักตัว "ทำงานได้ แต่ไม่สามารถเพาะได้" ดังนั้นพวกมันจึงไม่สามารถกู้คืนได้ในสื่อทั่วไป.
การอ้างอิง
- Lau SK, Woo PC, ฮุ่ย WT และคณะ ใช้ cefoperazone MacConkey agar สำหรับการคัดแยกแบบเลือก Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003 41 (10): 4839-41.
- "MacConkey Agar" Wikipedia, สารานุกรมฟรี. 4 เม.ย. 2018, 18:16 UTC 29 ธ.ค. 2018, 15:22 en.wikipedia.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด อาร์เจนตินา Panamericana S.A บทบรรณาธิการ.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา (ฉบับที่ 5) อาร์เจนตินา, Panamericana บรรณาธิการ.
- Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. ผลของสื่อวัฒนธรรมที่เตรียมด้วยน้ำทะเลต่อตัวชี้วัดสุขภาพในน่านน้ำทะเลของสปา Chichiriviche, Falcón state, เวเนซุเอลา. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
- García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994) จุลชีววิทยาคลินิกภาคปฏิบัติ มหาวิทยาลัยกาดิซรุ่นที่ 2 บริการสิ่งพิมพ์ UCA.