Cetrimida agar Foundation, การเตรียม, การใช้ประโยชน์

เจทริติเจล หรือเซทริไมด์เป็นสื่อวัฒนธรรมที่เป็นของแข็งซึ่งคัดเลือกมาเพื่อการแยก Pseudomonas aeruginosa. มันขึ้นอยู่กับการเน้นการผลิตลักษณะสีของสายพันธุ์นี้และได้รับการพัฒนาจากการดัดแปลงของ Tech agar สร้างโดย King, Ward และ Raney.

สูตรดั้งเดิมประกอบด้วยเกลือแมกนีเซียมคลอไรด์โพแทสเซียมซัลเฟตการย่อยอาหารของตับอ่อนเจลาตินและวุ้น - วุ้น การดัดแปลงของสูตรประกอบด้วยการเติม cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) และ glycerol.

Cetrimide agar มีประโยชน์สำหรับการศึกษาทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างที่มีอยู่ Pseudomonas aeruginosa. ควรสังเกตว่าแบคทีเรียนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งเพราะถึงแม้ว่ามันจะเป็นส่วนหนึ่งของ microbiota สิ่งแวดล้อมปกติก็มักจะทำงานเหมือนเชื้อโรคฉวยโอกาส.

ดังนั้นหนึ่งในปัญหาที่พบบ่อยที่สุดที่เกิดจากเชื้อโรคนี้คือการติดเชื้อในโรงพยาบาลนั่นคือสิ่งที่เกิดขึ้นในสภาพแวดล้อมของโรงพยาบาลโจมตีผู้ป่วยที่มีระบบภูมิคุ้มกันหดหู่.

ในทางตรงกันข้ามเนื่องจากความสัมพันธ์ที่จุลินทรีย์นี้มีความชื้นเป้าหมายการปนเปื้อนที่เปราะบางที่สุดคือ: อุปกรณ์ช่วยหายใจ, ยา, nebulizers, แหล่งน้ำ, เครื่องปรับอากาศ, น้ำยาฆ่าเชื้อ, น้ำยาสบู่, สารละลายฉีด, แผลเปิด , สายสวน, สายสวนปัสสาวะ, กลุ่มอื่น ๆ.

ในแง่นี้ cetrimide agar มีประโยชน์ในการควบคุมจุลินทรีย์และพืชให้กับองค์ประกอบที่มีชื่อก่อนหน้านี้.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
  • 1.1 การตีความ
• 2 การเตรียมการ
• 3 ใช้
• 4 เมล็ด
• 5 ข้อ จำกัด
• 6 การควบคุมคุณภาพ
• 7 อ้างอิง

มูลนิธิ

Cetrimide agar ขึ้นอยู่กับความสามารถของสื่อในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของ P. aeruginosa, กระตุ้นการผลิตเม็ดสีและยับยั้งการเติบโตของจุลินทรีย์อื่น ๆ.

คุณสมบัติเหล่านี้เกิดจากฟังก์ชั่นที่แต่ละองค์ประกอบมีคุณสมบัติครบถ้วน ปัจจุบันเจลาตินเปปโตนทำหน้าที่เป็นแหล่งของไนโตรเจนวิตามินและแร่ธาตุ กลีเซอรอลหรือกลีเซอรีนทำงานเป็นแหล่งคาร์บอน.

ในส่วนของมัน cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) เป็นสารที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียอื่นที่ไม่ใช่ P. aeruginosa, รวมถึงสายพันธุ์อื่น ๆ ที่เป็นของสกุลเดียวกัน.

การยับยั้งเกิดขึ้นเนื่องจาก cetramide ทำหน้าที่เป็นผงซักฟอกประจุบวกทำให้เกิดการพังผืดในพลาสมาเมมเบรนของแบคทีเรียส่วนใหญ่ยกเว้น P. aeruginosa และคนอื่น ๆ ที่สามารถเอาชีวิตรอดได้.

ในทางกลับกันก็มีแมกนีเซียมคลอไรด์และโพแทสเซียมซัลเฟต สารประกอบเหล่านี้กระตุ้นการแสดงออกทางฟีโนไทป์ที่เกี่ยวข้องกับความสามารถของ Pseudomonas aeruginosa ในการผลิตเม็ดสีต่างๆในหมู่พวกเขา: pyocyanin, pioverdin, piorubin, piomelanin และ fluorescein ในที่สุดมันก็มี agar-agar ซึ่งให้ความมั่นคงที่มั่นคง.

การตีความ

การตีความการเจริญเติบโตที่เกิดขึ้นในวุ้นนี้ทำขึ้นด้วยวิธีดังต่อไปนี้:

การสังเกตของอาณานิคมกลมเรียบที่มีขอบปกติทำให้เกิดเม็ดสีสีฟ้าสีเขียวสีเขียวสีน้ำตาลหรือสีแดงรวมทั้งการปล่อยกลิ่นผลไม้ (aminoacetophenone) เป็นผลสันนิษฐานจากการปรากฏตัวของแบคทีเรียในตัวอย่างดังกล่าว.

ในทางกลับกันมันบ่งบอกถึง P. aeruginosa การสังเกตของเม็ดสีสีเขียวแกมเหลืองสว่างในอาณานิคมเมื่อแผ่นสัมผัสกับแสงอัลตราไวโอเลต.

ควรสังเกตว่าสีที่สังเกตแต่ละอันเกิดจากการผลิตเม็ดสีเฉพาะ เม็ดสีเขียวสีน้ำเงินสอดคล้องกับการผลิต pyocyanin, สีเขียวถึง pioverdin, สีแดงถึง piorrubin, สีน้ำตาลถึง piomelanin และเรืองแสงสีเหลืองสีเขียวสีเขียวภายใต้แสงอัลตราไวโอเลตเพื่อ fluorescein.

การจัดเตรียม

น้ำหนัก 43 กรัมของตัวกลางที่ถูกทำให้แห้งและละลายในน้ำกลั่น เพิ่มกลีเซอรีน 10 มล. นำส่วนผสมไปยังแหล่งความร้อน ต้มต่อไปอีกสักครู่จนละลายหมด.

Autoclave ที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที ปล่อยให้ยืนและเสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อที่ผ่านการฆ่าเชื้อเมื่ออุณหภูมิอยู่ที่ประมาณ 50 ° C.

อนุญาตให้แข็งตัวกลับลำดับใน Plaquers และเก็บในตู้เย็นจนกว่าจะใช้ ในการปลูกแผ่นเจทริมไรด์พวกมันควรจะถูกลบออกจากตู้เย็นล่วงหน้าและอนุญาตให้ใช้อุณหภูมิห้อง.

ค่า pH สุดท้ายของสื่อควรเป็น 7.2 ± 0.2.

สีของสื่อที่ถูกคายน้ำคือสีเบจและการเตรียมเป็นสีขาวขุ่น.

การใช้งาน

Cetrimide agar สามารถใช้ปลูกพืชตัวอย่างทุกชนิดที่มีอยู่ Pseudomonas aeruginosa. ดังนั้นจึงมีประโยชน์ในทุกด้านของจุลชีววิทยา (สิ่งแวดล้อม, อุตสาหกรรม, คลินิก, น้ำและอาหาร).

มันมีความสำคัญอย่างยิ่งในการวิเคราะห์สภาพแวดล้อมของโรงพยาบาลและทำให้สามารถใช้การไกล่เกลี่ยที่ถูกต้องเนื่องจากจุลินทรีย์นี้จะเข้าถึงผู้ป่วยผ่านอุปกรณ์, ยา, การแก้ปัญหาและอุปกรณ์ที่ปนเปื้อนที่ใช้โดยผู้ป่วย.

ด้วยวิธีนี้จุลินทรีย์สามารถติดเชื้อทางเดินหายใจส่วนล่างทางเดินปัสสาวะและแผลของผู้ป่วยที่ได้รับภูมิคุ้มกันบกพร่อง.

สามารถนับโคโลนีได้ P. aeruginosa ในการทดสอบขีด จำกัด ของจุลินทรีย์.

ปลูก

Cetrimide วุ้นสามารถใช้เป็นวัฒนธรรมหลัก แผ่นมีการฉีดวัคซีนที่หนึ่งในขอบของมันและจากนั้นมีการกระจายโดยอ่อนเพลียไปยังส่วนที่เหลือของแผ่น ตัวอย่างของเหลวสามารถหว่านบนพื้นผิวด้วยไม้พาย drigalski.

เพลตถูกบ่มใน aerobiosis ที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงของการบ่ม.

ข้อ จำกัด

-เปอร์เซ็นต์ของสายพันธุ์เล็ก ๆ  Pseudomonas aeruginosa ห้ามผลิต pyocyanin ดังนั้นคุณสามารถตีความการลบที่ผิดพลาดได้.

-Pseudomonas ที่มีความสำคัญทางคลินิกบางชนิดถูกยับยั้งในสื่อนี้.

-แม้จะสังเกตลักษณะเฉพาะที่อธิบายไว้สำหรับ Pseudomonas aeruginosa, พวกเขาจะต้องได้รับการยืนยันด้วยการทดสอบบัตรประจำตัวเพิ่มเติม การทดสอบที่ไม่ควรพลาดคือการทดสอบออกซิเดชันก็ควรจะเป็นบวก.

-enterobacteria บางชนิดสามารถเจริญเติบโตได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อนี้และพัฒนาเม็ดสีเหลือง แต่มันก็แตกต่างจาก Pseudomonas aeruginosa ซึ่งเมื่ออยู่ภายใต้แสงอุลตร้าไวโอเล็ตจานจะเรืองแสงไม่มี.

-Serratia marcescens จัดการเพื่อพัฒนาและผลิตเม็ดสีสีชมพู.

-หากโล่ที่มีเมล็ดของเซทริมไรด์ถูกสัมผัสเป็นเวลาหนึ่งที่อุณหภูมิห้องสายพันธุ์ของ P. aeruginosa พวกเขาสามารถสูญเสียแสงฟลูออเรสเซนซ์ที่สังเกตได้ภายใต้แสงอุลตร้าไวโอเลตอย่างไรก็ตามคุณสมบัติจะถูกกู้คืนหากบ่มในอุณหภูมิ 37 ° C.

การควบคุมคุณภาพ

เพื่อทดสอบการทำงานที่เหมาะสมของ cetrimide agar สามารถใช้สายพันธุ์ควบคุมได้เช่น: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 และ เชื้อ Staphylococcus aureus ATCC 25923.

ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือ:

• ไปยัง P. aeruginosa การเติบโตที่ดีมีเม็ดสีเขียวแกมน้ำเงินและฟลูออไรเซซิน.
• S. maltophilia และ S. aureus จะถูกยับยั้งบางส่วนหรือทั้งหมด.
• คาดว่า Escherichia coli ถูกยับยั้งอย่างสมบูรณ์.

การอ้างอิง

1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. ฟีโนไทป์และลักษณะทางเซรุ่มวิทยาของเชื้อที่แยกได้จากคลินิก Pseudomonas aeruginosa VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
2. Laboratories Conda Pronadisa ฐานวุ้น Cetrimide 2014. จำหน่ายที่: condalab.com
3. ห้องปฏิบัติการ Britania Cetrimida agar 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com
4. BD Laboratories BD Pseudosel agar (Cetrimide agar) 2013 จำหน่ายได้ที่: bd.com
5. ห้องปฏิบัติการ Francisco Soria Melguizo, C.A. เจทริไทด์วุ้น 2552 มีจำหน่ายที่: http://f-soria.es