มูลนิธิ Agar BHI การเตรียมและการใช้งาน



BHI วุ้น หรือ Brain Heart Infusion agar เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีคุณค่าทางโภชนาการ ในภาษาสเปนเราเรียกมันว่า agar heart infusion มันเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่ผ่านการเลือกซึ่งหมายความว่าแบคทีเรียแกรมบวกและแกรมลบทุกประเภทสามารถพัฒนาได้รวมทั้งเชื้อรายีสต์และใยบางชนิด.

มันประกอบไปด้วยสมองลูกวัวและการแช่หัวใจ, ไฮโดรไลเสตในเนื้อเยื่อสัตว์, ตับอ่อนไฮโดรไลเสตเคซีน, โซเดียมคลอไรด์, กลูโคส, disodium ฟอสเฟตและวุ้น.

ควรสังเกตว่า BHI agar เป็นหนึ่งในสื่อทางวัฒนธรรมที่พบบ่อยที่สุดในห้องปฏิบัติการแบคทีเรียวิทยา มันสามารถใช้งานได้โดยไม่ต้องเสริมอาหารเป็นวัฒนธรรมหลักวัฒนธรรมย่อยของโคโลนีที่ได้รับในสื่อเลือกอื่น ๆ หรือสำหรับการบำรุงรักษาสายพันธุ์ในห้องปฏิบัติการ.

ในทางกลับกันมันเป็นสื่อที่เหมาะที่จะใช้เป็นฐานในการเตรียมสื่อที่มีการตกแต่งเช่นเลือดวุ้นและช็อกโกแลตวุ้น ทั้งในอุดมคติที่จะแยกเชื้อจุลินทรีย์ที่เรียกร้องจากมุมมองทางโภชนาการ อย่างไรก็ตามต้องคำนึงว่าเนื่องจากมีกลูโคสจึงไม่เพียงพอที่จะสังเกตรูปแบบของภาวะเม็ดเลือดแดงแตก.

ในทำนองเดียวกัน BHI agar สามารถใช้ในการเตรียมวิธีพิเศษสำหรับการแยกเชื้อจุลินทรีย์ก่อโรคที่มีการเจริญเติบโตยากในสื่อทั่วไปในหมู่พวกเขา: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae และ Histoplasma capsulatum.

ด้วยสารเติมแต่งยาปฏิชีวนะ BHI agar จะกลายเป็นตัวกลางในการคัดเลือกเพื่อแยกเชื้อรา.

ดัชนี

  • 1 มูลนิธิ
  • 2 การเตรียมการ
    • 2.1 เวดจ์
    • 2.2 แผ่น
    • 2.3 การเตรียมวุ้นเลือด
  • 3 ใช้
    • 3.1 ใช้โดยไม่มีอาหารเสริม
    • 3.2 เป็นฐานในการจัดทำสื่ออื่น ๆ
  • 4 การควบคุมคุณภาพ
  • 5 อ้างอิง

มูลนิธิ

เป็นอาหารที่มีคุณค่าทางโภชนาการในการแยกเชื้อจุลินทรีย์ที่มีความต้องการปานกลางสามารถเพิ่มคุณค่าด้วยการเติมเลือดและอาหารเสริมอื่น ๆ.

มันเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่ผ่านการคัดเลือกจึงช่วยให้แบคทีเรียแกรมบวกและแกรมลบส่วนใหญ่เติบโตเช่นเดียวกับเชื้อราบางชนิด อย่างไรก็ตามมันสามารถเลือกได้ด้วยการเพิ่มยาปฏิชีวนะ.

สื่อประกอบด้วยสมองลูกวัวและหัวใจ, เปปไทด์ไฮโดรไลเสตจากเนื้อเยื่อสัตว์และไฮโดรไลเสตในตับอ่อนเคซีน สารประกอบเหล่านี้ทำหน้าที่เป็นแหล่งของวิตามินกรดอะมิโนไนโตรเจนและคาร์บอน.

กลูโคสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่ให้พลังงานแก่จุลินทรีย์เมื่อหมักแล้ว ในขณะที่โซเดียมคลอไรด์และไดโซเดียมฟอสเฟตรักษาสมดุลของออสโมติกและให้ค่า pH ใกล้เคียงกับความเป็นกลาง ในที่สุดวุ้นให้ความมั่นคงที่มั่นคงกับสื่อ.

การจัดเตรียม

มีน้ำหนักปานกลาง 52 กรัมและละลายในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร นำส่วนผสมไปยังแหล่งความร้อนจนกว่าจะเดือดกวนบ่อยในระหว่างกระบวนการละลาย.

คุณสามารถเตรียมเวดจ์หรือเพลตของ BHI วุ้นโดยไม่ต้องเติมแต่ง.

ร่อน

สำหรับการเตรียมเวดจ์ให้บริการการเตรียมการจนเต็มครึ่งหนึ่งของแต่ละหลอดครอบคลุมและฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดันที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาทีเมื่อออกไปนอนบนฐานจนกว่าพวกเขาจะแข็งตัว จากนั้นเก็บในตู้เย็นจนกว่าจะใช้.

แผ่น

ส่วนผสมที่ละลายจะถูกนึ่งที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาทีเมื่อทิ้งไว้ให้เย็นถึง 50 ° C และอาหาร 20 มล. จะเสิร์ฟในจานเลี้ยงเชื้อปลอดเชื้อ พวกเขาได้รับอนุญาตให้แข็งกลับด้านและเก็บในตู้เย็นจนกว่าพวกเขาจะใช้ อนุญาตให้แผ่นที่จะใช้อุณหภูมิห้องก่อนปลูก.

ค่าความเป็นกรด - ด่างของอาหารควรอยู่ที่ 7.4 ± 0.2.

สื่อที่ไม่ได้เตรียมไว้คือสีเบจและเตรียมไว้เป็นสีเหลืองอำพัน.

การเตรียมวุ้นเลือด

หลังจากการฆ่าเชื้อในสื่อให้เย็นที่อุณหภูมิประมาณ 45 ถึง 50 ° C ในเวลานี้เพิ่มเลือด (50 มล.) ผสมเบา ๆ เพื่อทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและ aseptically ให้บริการ 20 มล. ในแต่ละจานเลี้ยงเชื้อ หากฟองเกิดขึ้นบนจานเปลวไฟของเครื่องเขียนควรจะถูกส่งผ่านไปอย่างรวดเร็วเพื่อกำจัดพวกเขา.

ในทำนองเดียวกันสื่อพิเศษสามารถเตรียมโดยการเพิ่มสารเติมแต่งที่สอดคล้องกันเมื่อส่วนผสมถึงอุณหภูมิ 45 ถึง 50 ° C.

กลางเป็นสีแดงเชอร์รี่.

การใช้งาน

ใช้โดยไม่ต้องเสริม

BHI agar ที่ไม่ใช้สารเติมแต่งนั้นมีประโยชน์ในฐานะเป็นวัฒนธรรมหลักและสำหรับการเพาะเชื้อจุลินทรีย์บริสุทธิ์ที่มีขนาดปานกลางหรือปานกลาง.

เนื่องจากเป็นสื่อสีอ่อนจึงเหมาะสำหรับการสังเกตสีและเนื่องจากไม่มีสารที่รบกวนจึงสามารถใช้ในการทดสอบทางชีวเคมีเช่น oxidase และ catalase หรือทำการทดสอบทางชีวเคมีอื่น ๆ จากอาณานิคมที่เกิดจากสิ่งนี้ วุ้น.

ในทำนองเดียวกัน BHI agar wedges ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการบำรุงรักษาสายพันธุ์ตามเวลาที่กำหนดในห้องปฏิบัติการ (แบคทีเรีย).

แผ่นหรือเวดจ์ที่ปลูกบนพื้นผิวด้วยเชื้อแบคทีเรียจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมง ในขณะที่เชื้อราอุณหภูมิและเวลาฟักตัวจะขึ้นอยู่กับชนิดของเชื้อราที่ต้องการ.

เป็นฐานในการจัดทำสื่ออื่น ๆ

ด้วยฐานนี้สามารถเตรียมสื่อที่อุดมและเลือก.

อุดม

หน้าที่หลักของมันคือการทำหน้าที่เป็นพื้นฐานในการเตรียม agar เลือดสำหรับใช้เป็นประจำในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งฐาน BHI เอื้อต่อการแยกสายพันธุ์ Streptococcus sp. อย่างไรก็ตามมันมีข้อเสียที่ไม่เหมาะสำหรับการสังเกตรูปแบบการแตกของเม็ดเลือดแดงเนื่องจากมีกลูโคส.

มันยังใช้ในการจัดทำกระต่ายหรือวุ้นเลือดม้าสำหรับแยก Haemophilus sp. เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีขึ้นคุณสามารถเพิ่มอาหารเสริม (IsoVitaleX).

หากตัวอย่างมาจากระบบทางเดินหายใจไปยังวุ้นสามารถเพิ่มแบคซิทราซินเพื่อยับยั้งการติดเชื้อของพืชและเพิ่มโอกาสในการฟื้นตัวของสายพันธุ์ของ Haemophilus sp.

ในอีกทางหนึ่ง agar เลือด (แกะหรือมนุษย์) สามารถเตรียมด้วยซีสทีน tellurite เพื่อแยก Corynebacterium diphtheriae. ในทำนองเดียวกันมันจะมีประโยชน์ในการเตรียมวุ้นเลือดกระต่ายด้วยนอกเหนือจากซีสตีนและกลูโคสสำหรับการแยก Francisella tularensis.

การเพาะของแผ่นวุ้นในเลือดนั้นทำโดยการอ่อนเพลียและบ่มที่ 35-37 ° C เป็นเวลา 24-48 ชั่วโมงใน microaerophilic (CO 5-10%)2).

เลือก

สื่อนี้ที่มีการเติมยาปฏิชีวนะสามารถแทนที่วุ้น Sabouraud เพื่อแยกเชื้อรา.

การรวมกันของ BHI วุ้นกับ chloramphenicol - gentamicin หรือ penicillin -, streptomycin และเลือดม้าเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการแยก ฮีสโตพลาสม่าแคปซูล.

แนะนำให้ใช้การบ่มที่อุณหภูมิ 35-37 ° C หรือที่อุณหภูมิห้องในแอโรบิกซิสทั้งนี้ขึ้นอยู่กับจุลินทรีย์ที่จะแยก บางครั้งการฟักตัวเป็นสิ่งจำเป็นในช่วงอุณหภูมิทั้งสองโดยใช้ 2 แผ่นสำหรับสิ่งนี้.

เชื้อราบางคนชอบ Trichophyton mentagrophytes ควรบ่มที่อุณหภูมิห้องนานถึง 7 วัน.

การควบคุมคุณภาพ

จากการเตรียมแต่ละชุดขอแนะนำให้ฟักไข่ 1 แผ่นหรือลิ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงและตรวจสอบว่าไม่มีการเจริญเติบโต; มีความสำคัญอย่างยิ่งเมื่อเตรียมวุ้นในเลือดเพราะเป็นอาหารที่ปนเปื้อนได้ง่าย.

ในทางกลับกันคุณภาพของสื่อสามารถประเมินได้โดยการฉีดวัคซีนสายพันธุ์มาตรฐานที่รู้จักหรือรับรองแล้วและสังเกตการพัฒนา.

ในแง่นี้เพื่อประเมิน BHI agar ที่ไม่มีสารเติมแต่ง Escherichia coli ATCC 25922, เชื้อ Staphylococcus aureus ATCC 25923 หรือ Candida albicans ATCC 10231 พวกเขาถูกบ่มที่ 37 ° C ใน aerobiosis เป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมง ในทุกกรณีคาดว่าการเติบโตที่น่าพอใจ.

เพื่อประเมินแผ่นเจลเลือด  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 หรือ Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

แบคทีเรียสายพันธุ์ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน microaerophilicus เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในขณะที่เชื้อราถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องในห้องที่มีความชื้นสูงถึง 7 วัน ในทุกกรณีคาดว่าการเติบโตที่น่าพอใจ.

การอ้างอิง

  1. ห้องปฏิบัติการ Britania Agar สมองสมองแช่ 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com.
  2. BD Laboratories วุ้นหัวใจแช่ (BHI) วุ้น 2013 จำหน่ายได้ที่: bd.com.
  3. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories, S.A. วุ้นหัวใจแช่หัวใจ 2009.
  4. ห้องปฏิบัติการ Neogen วุ้นหัวใจแช่หัวใจ มีจำหน่ายที่: foodsafety.neogen.com
  5. Gil M. Agar blood: รากฐานการใช้และการจัดเตรียม 2561 จำหน่ายที่: lifeder.com.
  6. ผู้มีส่วนร่วมใน Wikipedia แช่หัวใจสมอง Wikipedia, สารานุกรมเสรี 19 กันยายน 2018, 03:58 UTC ได้ที่: wikipedia.org เข้าใช้ 2 มีนาคม 2019.
  7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด บรรณาธิการ Panamericana S.A. อาร์เจนตินา.