ประเภทการทดสอบทางชีวเคมีสิ่งที่พวกเขามีไว้สำหรับและที่สำคัญ

การทดสอบทางชีวเคมี ในจุลชีววิทยาพวกเขาเป็นชุดทดสอบทางเคมีที่ดำเนินการกับจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในตัวอย่างเพื่อระบุพวกเขา; จุลินทรีย์เหล่านี้มักจะเป็นแบคทีเรีย มีการทดสอบทางชีวเคมีจำนวนมากสำหรับนักจุลชีววิทยา.

อย่างไรก็ตามทางเลือกของการทดสอบเหล่านี้ขึ้นอยู่กับการค้นพบเบื้องต้นเช่นรูปแบบคราบแกรมและลักษณะการเจริญเติบโตซึ่งช่วยให้แบคทีเรียได้รับมอบหมายให้อยู่ในประเภทเฉพาะ การทดสอบทางชีวเคมีนั้นขึ้นอยู่กับคุณสมบัติการเผาผลาญของแบคทีเรียแต่ละชนิดเป็นหลัก. 

ไม่ใช่แบคทีเรียทุกชนิดที่มีคุณสมบัติเหมือนกันดังนั้นจึงมีการตรวจสอบว่าพวกมันมีเอนไซม์ชนิดใดโดยการเพิ่มสารตั้งต้นและรอปฏิกิริยาที่จะเกิดขึ้น โดยทั่วไปการตัดสินใจนี้จะได้รับจากการเปลี่ยนสีหรือค่าความเป็นกรดเป็นด่างในอาหารเลี้ยงเชื้อ.

การทดสอบทางชีวเคมีน้อยกว่า 15 ครั้งนั้นจำเป็นสำหรับการจำแนกแบคทีเรียที่เชื่อถือได้จนถึงระดับสปีชีส์ การทดสอบทางชีวเคมีเพิ่มเติมสามารถเพิ่มความมั่นใจในการระบุตัวตน.

การทดสอบทางชีวเคมีส่วนใหญ่ดำเนินการในซีรัมหรือเลือด อย่างไรก็ตามพวกเขายังสามารถดำเนินการในการหลั่งทางชีวภาพอื่น ๆ เช่นปัสสาวะ, น้ำไขสันหลัง, ของเหลวเยื่อหุ้มปอดและอุจจาระในหมู่คนอื่น ๆ.

ดัชนี

• 1 การจำแนกประเภท
  • 1.1 Universal
  • 1.2 ส่วนต่าง
  • 1.3 เจาะจง
• การทดสอบทางชีวเคมี 2 ประเภท
  • 2.1 การทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยา
  • 2.2 การทดสอบออกซิเดส
  • 2.3 การทดสอบเกลือ Mannitol Agar (MSA)
  • 2.4 การทดสอบ Coagulase
  • 2.5 การทดสอบยูเรีย
• 3 การทดสอบทางชีวเคมีมีไว้เพื่ออะไร??
• 4 ความสำคัญ
• 5 อ้างอิง

การจัดหมวดหมู่

การทดสอบทางชีวเคมีสามารถแบ่งออกเป็น 3 กลุ่ม:

สากล

เหล่านี้คือการทดสอบที่สามารถดำเนินการกับตัวอย่างใด ๆ และเป็นแนวทางให้นักจุลชีววิทยาในการทดสอบทางชีวเคมีต่อไปนี้ที่จะต้องดำเนินการเพื่อให้ได้บัตรประจำตัวที่เชื่อถือได้.

ตัวอย่าง

การทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยาและออกซิเดส.

ความแตกต่าง

นี่คือการทดสอบที่ดำเนินการเพื่อระบุจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในตัวอย่างจนถึงระดับสปีชีส์.

การระบุจะทำขึ้นอยู่กับผลของการรวมกันของการทดสอบเนื่องจากผลลัพธ์ของแต่ละบุคคลไม่ได้ให้ข้อมูลเพียงพอที่จะทำการระบุตัวตน.

ตัวอย่าง

การทดสอบ IMViC และการทดสอบการใช้ประโยชน์น้ำตาล.

โดยเฉพาะ

พวกมันเป็นการทดสอบที่เฉพาะเจาะจงสำหรับสปีชีส์หนึ่ง ๆ หรือสปีชีส์ย่อย การทดสอบเหล่านี้มักจะทำเพื่อยืนยันหรือระบุในระดับย่อย การทดสอบส่วนบุคคลนั้นให้ข้อมูลด้วยตนเอง.

ตัวอย่าง

การทดสอบγ-Glutamyl aminopeptidase.

ประเภทของการทดสอบทางชีวเคมี

การทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยา

การทดสอบ catalase เป็นการทดสอบเพื่อแสดงการมีเอนไซม์ catalase โดยการย่อยสลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นออกซิเจนและน้ำ แบคทีเรียจำนวนเล็กน้อยถูกเติมลงในสไลด์ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (3%) บนสไลด์.

การทดสอบ catalase เป็นการทดสอบอย่างง่ายที่ใช้โดยนักจุลชีววิทยาเพื่อช่วยระบุชนิดของแบคทีเรียและเพื่อตรวจสอบความสามารถของจุลินทรีย์บางชนิดในการสลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์โดยการผลิตเอนไซม์ catalase.

หากสังเกตฟองออกซิเจนก็หมายความว่าแบคทีเรียมีเอนไซม์คาตาเลสเนื่องจากเร่งการสลายตัวของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นออกซิเจนและน้ำ ว่ากันว่าสิ่งมีชีวิตนั้นเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาที่เป็นบวก (ตัวอย่างเช่น: เชื้อ Staphylococcus aureus).

การทดสอบออกซิเดส

การทดสอบนี้ใช้เพื่อระบุจุลินทรีย์ที่มีเอนไซม์ไซโตโครมออกซิเดส (สำคัญในห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอน) มันถูกใช้โดยทั่วไปเพื่อแยกความแตกต่างระหว่างตระกูล Enterobacteriaceae และ Pseudomadaceae.

Cytochrome oxidase ถ่ายโอนอิเล็กตรอนจากห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอนไปยังออกซิเจน (ตัวรับอิเล็กตรอนสุดท้าย) และลดลงในน้ำ การทดสอบออกซิเดสจะให้โมเลกุลของผู้บริจาคอิเล็กตรอนและตัวรับเทียม.

เมื่อผู้บริจาคอิเล็กตรอนถูกออกซิไดซ์โดยการกระทำของไซโตโครมออกซิเดสตัวกลางจะกลายเป็นสีม่วงเข้มและถือว่าเป็นผลบวก เชื้อจุลินทรีย์ Pseudomonas aeruginosa เป็นตัวอย่างของแบคทีเรีย oxidase ที่เป็นบวก.

การทดสอบวุ้นแมนนิทอล (MSA)

การทดสอบประเภทนี้มีทั้งแบบเลือกสรรและส่วนต่าง MSA จะเลือกสิ่งมีชีวิตที่สามารถอาศัยอยู่ในสภาพแวดล้อมที่มีความเข้มข้นของเกลือสูงเช่นสายพันธุ์ของ Staphylococcus ตรงกันข้ามกับสายพันธุ์ของ เชื่อแป็คที่เรียรูปทรงกลม, ซึ่งการเจริญเติบโตถูกยับยั้งภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้.

ส่วนประกอบที่แตกต่างในการทดสอบนี้คือน้ำตาลแมนนิทอล สิ่งมีชีวิตที่มีความสามารถในการใช้แมนนิทอลเป็นแหล่งอาหารจะสร้างผลพลอยได้จากการหมักซึ่งมีสภาพเป็นกรดและจะลดค่าความเป็นกรดด่างของตัวกลาง.

ความเป็นกรดของตัวกลางทำให้ตัวบ่งชี้ค่า pH, ฟีนอลสีแดง, เปลี่ยนเป็นสีเหลือง ตัวอย่างของชนิดของแบคทีเรียที่สามารถสร้างความแตกต่างด้วยวิธีนี้คือ: เชื้อ Staphylococcus aureus (บวกเพราะหมักแมนนิทอล) และ Staphylococcus epidermidis (ลบเพราะแมนนิทอลไม่หมัก).

การทดสอบ Coagulase

Coagulase เป็นเอนไซม์ที่ช่วยจับตัวเป็นก้อนในเลือด การทดสอบนี้ดำเนินการกับแบคทีเรียแกรมบวกและคาตาเลสบวก เชื้อ Staphylococcus aureus (coagulase เชิงบวก) ในความเป็นจริง coagulase เป็นปัจจัยความรุนแรงของแบคทีเรียชนิดนี้.

การก่อตัวของก้อนอุดตันรอบ ๆ การติดเชื้อที่เกิดจากแบคทีเรียนี้อาจปกป้องมันจาก phagocytosis การทดสอบนี้มีประโยชน์มากเมื่อคุณต้องการแยกความแตกต่างระหว่าง เชื้อ Staphylococcus aureus ของสายพันธุ์อื่น ๆ ของ Staphylococcus ซึ่งเป็นลบ coagulase.

การทดสอบยูเรีย

การทดสอบนี้ใช้เพื่อระบุแบคทีเรียที่มีความสามารถในการย่อยสลายยูเรียโดยใช้เอนไซม์ยูเรส มันถูกใช้โดยทั่วไปเพื่อแยกเพศ Proteus ของแบคทีเรียลำไส้อื่น ๆ.

การย่อยสลายของยูเรียผลิตแอมโมเนียเป็นหนึ่งในผลิตภัณฑ์ ฐานที่อ่อนแอนี้จะเพิ่มค่า pH ของสื่อที่สูงกว่า 8.4 และตัวบ่งชี้ค่า pH (สีแดงฟีนอล) เปลี่ยนจากสีเหลืองเป็นสีชมพู ตัวอย่างของแบคทีเรียยูเรียเชิงบวกคือ โพรทูส mirabilis.

การทดสอบทางชีวเคมีมีไว้เพื่ออะไร??

การทดสอบทางชีวเคมีในจุลชีววิทยานั้นใช้ในการวินิจฉัยโรคที่เกิดจากจุลินทรีย์ นอกจากนี้ยังใช้สำหรับการตรวจคัดกรองโรคติดเชื้อและการพยากรณ์โรค.

การระบุทางชีวเคมีของจุลินทรีย์เสนอความคิดว่าจุลินทรีย์เหล่านี้มีความสามารถในการทำอะไรบ้างการแยกแยะสายพันธุ์ที่แตกต่างกันของสายพันธุ์เดียวกันด้วยโปรไฟล์ชีวเคมีเฉพาะ.

ความแตกต่างในกิจกรรมของเอนไซม์เฉพาะเกี่ยวกับนิเวศวิทยา, สรีรวิทยาหรือที่อยู่อาศัยตามธรรมชาติของจุลินทรีย์ซึ่งในบางกรณีอาจถือได้ว่าเป็นข้อมูลที่สำคัญ.

ความสำคัญ

ความแตกต่างทางโครงสร้างเกี่ยวกับรูปร่างขนาดและการกำจัดของแบคทีเรียช่วยในกระบวนการระบุตัวตนน้อยมากเนื่องจากมีแบคทีเรียหลายชนิดที่มีรูปร่างขนาดและการจัดการคล้ายกัน.

ด้วยเหตุนี้ในที่สุดการระบุแบคทีเรียจึงขึ้นอยู่กับความแตกต่างของกิจกรรมทางชีวเคมีเป็นหลัก.

แบคทีเรียแต่ละชนิดมีชุดกิจกรรมการเผาผลาญที่แตกต่างจากสายพันธุ์อื่นทั้งหมด "ลายนิ้วมือ" ทางชีวเคมีเหล่านี้เป็นคุณสมบัติที่ควบคุมโดยเอนไซม์จากแบคทีเรีย.

ดังนั้นการทดสอบทางชีวเคมีจึงมีความสำคัญเนื่องจากช่วยให้นักวิจัยสามารถระบุเชื้อโรคที่มีอยู่ในตัวอย่างได้อย่างถูกต้องและด้วยวิธีนี้เพื่อให้สามารถแนะนำการรักษาที่เหมาะสมแก่ผู้ป่วย.

การอ้างอิง

1. Beckett, G. , Walker, S. และ Rae, P. (2010). ชีวเคมีคลินิก (8th ed.) Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P. H. , & Cowan, S. T. (1952) วิธีการทางชีวเคมีสำหรับแบคทีเรียวิทยา. วารสารจุลชีววิทยาทั่วไป, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A. , Murphy, M. , Srivastava, R. , Cowan, R. , St, D. & O'Reilly, J. (2013). ชีวเคมีคลินิก (ฉบับที่ 5) วิทยาศาสตร์สุขภาพของเอลส์เวียร์.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). คู่มือปฏิบัติการจุลชีววิทยา (2nd ed.) กด CRC.
5. Harrigan, W. (1998). วิธีการทางห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยาอาหาร (ฉบับที่ 3) สื่อวิชาการ.
6. Vasanthakumari, R. (2009). จุลชีววิทยาภาคปฏิบัติ. BI Publications Pvt Ltd.