รากฐาน Selenite น้ำซุปการเตรียมและการใช้งาน

selenite broth มันเป็นสื่อวัฒนธรรมของเหลวที่เลือกสรร มันถูกออกแบบโดย Leifson สำหรับการเพิ่มคุณค่าของตัวอย่างที่สงสัยว่ามีเชื้อแบคทีเรียก่อโรคของเชื้อ Salmonella ในสกุลนั้น.

สื่อนี้ตรงตามข้อกำหนดของ American Public Health Association (APHA) ดังนั้นจึงเป็นที่ยอมรับสำหรับการตรวจสอบเชื้อ Salmonella ในตัวอย่างอุจจาระปัสสาวะอาหารเหลวหรืออาหารแข็งน้ำและอื่น ๆ.

องค์ประกอบทางเคมีที่มีคุณสมบัติช่วยให้การฟื้นตัวของจุลินทรีย์เหล่านี้และในทางกลับกันยับยั้งการเจริญเติบโตของผู้อื่น ส่วนใหญ่เป็นพิษต่อแบคทีเรียส่วนใหญ่ที่อยู่ในวงศ์ Enterobacteriaceae อย่างไรก็ตามมันยังช่วยให้การฟื้นตัวของสายพันธุ์ของ Shigella และไม่ยับยั้งการเจริญเติบโตของ Pseudomonas และโพรทูส.

มันประกอบด้วยโซเดียมไฮดรัส selenite ปราศจากโซเดียมฟอสเฟต peptones และแลคโตส นอกจากนี้ยังมีตัวแปรที่เพิ่มซีสตีนด้วยเหตุนี้ชื่อซีเลนไนท์ - ซีสตีนน้ำซุป.

ในปัจจุบันมีการใช้น้ำซุปเซลีไนต์ - ซีสตีนเป็นที่ต้องการเนื่องจากได้รับการกู้คืนเชื้อ Salmonella ในสัดส่วนที่สูงกว่าเทียบเท่ากับการสังเกตด้วยสื่อคัดสรรอื่น ๆ ที่มีจุดประสงค์เดียวกันเช่น Tetrathionate sodium broth.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
• 2 การเตรียมการ
  • 2.1 - เซเลนา
  • 2.2- การเตรียมสื่อการค้า
  • 2.3 น้ำซุปซีลีนซีสทีนชนิดต่างๆ
• 3 ใช้
• 4 เมล็ด
• 5 การควบคุมคุณภาพ
• 6 ข้อ จำกัด
• 7 อ้างอิง

มูลนิธิ

peptones ที่อยู่ในน้ำซุปทำหน้าที่เป็นสารอาหารสำหรับการพัฒนาของจุลินทรีย์ที่เหมาะสม เชื้อซัลโมเนลล่าใช้เพปโทนเป็นแหล่งของไนโตรเจนวิตามินและกรดอะมิโน.

แลคโตสเป็นคาร์โบไฮเดรตที่หมักได้ในขณะที่โซเดียมเซเลนิทเป็นสารยับยั้งที่ชะลอการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียส่วนใหญ่ที่มีอยู่ในพืชในลำไส้โดยเฉพาะในตระกูล Enterobacteriaceae โซเดียมฟอสเฟตเป็นบัฟเฟอร์ที่ทำให้ค่า pH ของสื่อคงที่.

ในกรณีของตัวแปรน้ำเซเลไนท์ที่มี L-cystine สารประกอบเพิ่มเติมนี้เป็นสารช่วยลดที่ลดความเป็นพิษของซีลีไนท์ช่วยลดการฟื้นตัวของเชื้อ Salmonella.

การจัดเตรียม

-น้ำซุปเซเลไนต์

หากคุณมีส่วนประกอบของส่วนผสมคุณสามารถชั่งน้ำหนัก:

โซเดียมไฮดรอกไซด์โซเดียม 4 กรัม.

โซเดียมไฮดรอกไซด์ 10 กรัม.

5 gr ของ peptonas.

4 กรัมแลคโตส.

ละลายสารประกอบในน้ำกลั่นที่ปราศจากเชื้อ 1 ลิตร มันสามารถให้ความร้อนเล็กน้อยเพื่อละลายในสิ่งทั้งปวง.

ห้องแล็บบางแห่งอาจใช้สื่อไอน้ำได้คล่องเป็นเวลา 10 นาทีในการฆ่าเชื้อเนื่องจากไม่ควรใช้หม้อนึ่งความดัน หากสื่อถูกฆ่าเชื้อก็สามารถเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าจะมีการใช้.

นอกจากนี้ยังสามารถเตรียมได้โดยไม่ต้องผ่านการฆ่าเชื้อและให้บริการโดยตรงกับหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ 10 ถึง 15 มล.

ในกรณีนี้ควรปล่อยให้พักและใช้งานทันที เนื่องจากสื่อไม่ปลอดเชื้อจึงไม่สามารถเก็บไว้ในตู้เย็นเพื่อใช้ในภายหลังได้.

-การเตรียมสื่อการค้า

หากใช้สื่อการค้าจะมีการชั่งน้ำหนักและละลายน้ำ 23 กรัมในน้ำกลั่นปลอดเชื้อหนึ่งลิตร อบอุ่นสั้น ๆ เพื่อให้ละลาย อย่าฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดัน ทำหน้าที่ปลอดเชื้อ 10 หรือ 15 มล. ในหลอดทดสอบที่ปลอดเชื้อ.

ค่า pH สุดท้ายของสื่อควรเป็น 7.0 ± 0.2.

ควรสังเกตว่าสีของสื่อที่ถูกคายน้ำนั้นเป็นสีเบจและการเตรียมนั้นเป็นสีเหลืองอำพันที่ชัดเจนและโปร่งแสง.

น้ำซุปซีลีนซีสทีนชนิดต่างๆ

มันมีสารประกอบเดียวกันของ selenite broth แต่มีการเพิ่มซีสตีน 10 มก. ส่วนที่เหลือของขั้นตอนเหมือนกับที่อธิบายไว้ข้างต้น.

การใช้งาน

สื่อนี้มีความพิเศษที่จะใช้ในการศึกษาทางระบาดวิทยาในกรณีที่โรคไม่อยู่ในระยะเฉียบพลันผู้ป่วยที่ไม่มีอาการหรือผู้ให้บริการที่มีสุขภาพดี.

การแยกเชื้อซัลโมเนลล่ามักเป็นเรื่องยากเนื่องจากมักพบว่ามีการปนเปื้อนตัวอย่างในทางที่หายาก การอยู่ในปริมาณเล็กน้อยนั้นซ้อนทับกันได้ง่ายโดยการเจริญเติบโตของแบคทีเรียชนิดอื่นที่พบในปริมาณที่มากขึ้น.

ในทางกลับกันวัตถุดิบที่ใช้ในการแปรรูปอาหารมักถูกสัมผัสกับความร้อนกระบวนการทำให้แห้งในการใช้สารฆ่าเชื้อรังสีและสารกันบูดเป็นต้น.

ดังนั้น Salmonellas ที่มีอยู่ในวัตถุดิบจึงถูกทารุณกรรมโดยการส่งผลิตภัณฑ์ไปยังกระบวนการทางอุตสาหกรรมดังกล่าวข้างต้น ในกรณีของตัวอย่างทางคลินิกเช่นอุจจาระสายพันธุ์อาจอ่อนแอถ้าพวกเขามาจากผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ.

ดังนั้นตัวอย่างใดก็ตามที่สงสัยว่ามีเชื้อ Salmonella จะต้องได้รับการเสริมด้วยแลคโตสในน้ำซุปก่อนจากนั้นจึงเติมในเซเลนิท broth เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการกู้คืนในสื่อที่เลือกเช่น SS agar, ไซโลสไซโลส, lysine deoxycholate (XLD) ), Hektoen agar (HE) และ enteric Hear-green agar และอื่น ๆ.

ปลูก

สำหรับตัวอย่างอุจจาระใช้ตัวอย่าง 1 กรัมและแขวนในหลอดที่มีน้ำซุปเซลีไนต์ 10 ถึง 15 มล. หากอุจจาระเป็นของเหลวใช้เวลา 1 มล. และระงับในน้ำซุป สำหรับผ้าเช็ดปากทวารหนักให้ปล่อยวัสดุกวาดลงในน้ำซุป.

ในตัวอย่างของอาหารที่เป็นของแข็งใช้เวลา 1 กรัมและระงับในน้ำซุป selenite.

ในอาหารเหลวผสมในส่วนเท่า ๆ กันกับน้ำซุปเซเลไนต์ที่ความเข้มข้นสองเท่า.

สำหรับเครื่องหมุนเหวี่ยงตัวอย่างปัสสาวะให้ทิ้งส่วนที่เหลือให้นำตะกอนทั้งหมดและแขวนลอยในน้ำซุปเซเลไนต์.

น้ำซุปจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง การเจริญเติบโตของแบคทีเรียเป็นหลักฐานโดยความขุ่น นอกจากนี้ยังสามารถรวมหลอดเพิ่มเติมต่อตัวอย่างเพื่อบ่มที่อุณหภูมิ 42 ° C จากนั้นจึงทำการเลือกสื่อที่เป็นของแข็งจากน้ำซุปเซเลไนต์.

การควบคุมคุณภาพ

เพื่อควบคุมความแห้งแล้งน้ำซุปซีลีไนต์จากแต่ละชุดที่ไม่มีการฉีดวัคซีนจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง คาดว่าจะไม่มีความขุ่นหรือการเปลี่ยนสีของตัวกลาง.

เพื่อควบคุมการทำงานที่ดีของสื่อสามารถใช้สายพันธุ์ที่รู้จักเช่น:

เชื้อ Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  เชื้อ Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 และ โพรทูส mirabilis ATCC 43071.

ผลลัพธ์ที่คาดหวังคือ:

• สำหรับแบคทีเรียสามสายพันธุ์การเจริญเติบโตจะต้องเป็นที่น่าพอใจ.
• ไปยัง Escherichia coli ยับยั้งบางส่วน.
• สำหรับโพรทูสเติบโตปานกลาง.

ข้อ จำกัด

น้ำซุปเซลีไนท์ขนาดกลางเป็นพิษต่อผิวหนังมนุษย์ดังนั้นควรหลีกเลี่ยงการสัมผัสโดยตรง.

การอ้างอิง

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. การเปรียบเทียบระหว่างสื่อวัฒนธรรมของโซเดียม selenite และ tetrathionate ของโซเดียมทั้งบ่มที่ 37 ° C และ 42 ° C สำหรับ ความเหงาของ Salmonella อุจจาระของผู้ให้บริการอุจจาระ. Rev Biomed 2003 14 (4): 215-220
2. ห้องปฏิบัติการ Britania Selenito Caldo 2558 มีจำหน่ายที่: britanialab.com
3. Neogen Laboratories เซเลนิโต้น้ำซุป มีจำหน่ายที่: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira - Sanandres N, Soto -Valela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal - Camacho J. การแยกทางจุลชีววิทยาของ Salmonella spp. และเครื่องมือระดับโมเลกุลสำหรับการตรวจจับ สุขภาพ, บาร์รันกียา 2014; 30 (1): 73-94 วางจำหน่ายจาก: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009) การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของ Bailey & Scott 12 เอ็ด บรรณาธิการ Panamericana S.A. อาร์เจนตินา.