น้ำซุป lactosado มูลนิธิการเตรียมและการใช้งาน

แลคโตสน้ำซุป เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่ผ่านการคัดสรรใช้เป็นสื่อกลางในการแยกเชื้อซัลโมเนลล่าจากการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาบนอาหารแปรรูปผลิตภัณฑ์จากนมหรือน้ำ ได้รับการแนะนำโดยคณะกรรมาธิการระหว่างประเทศว่าด้วยข้อกำหนดทางจุลชีววิทยาสำหรับอาหาร (ICMPF).

สื่อประกอบด้วยการย่อยเอนไซม์ของเจลาติน, สารสกัดจากเนื้อสัตว์และแลคโตส, สารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย นอกจากนี้แลคโตสยังเป็นคาร์โบไฮเดรตที่หมักได้ดังนั้นโคลิฟอร์มบางชนิดสามารถแยกได้ด้วยการผลิตก๊าซ.

ด้วยเหตุนี้น้ำซุปแลคโตสจึงถูกแนะนำโดยสมาคมสาธารณสุขแห่งสหรัฐอเมริกา (APHA) สำหรับการศึกษาการสันนิษฐานของแบคทีเรียโคลิฟอร์มทั้งหมดและฟีแคลซึ่งถือว่าเป็นทางเลือกที่ยอดเยี่ยมในการแทนที่น้ำซุปลอริลซัลเฟตไทรป์โทสในเทคนิคมาตรฐาน ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างอาหารนมและน้ำผิวดินใต้ดินสถานที่พักผ่อนหย่อนใจขยะในประเทศและอุตสาหกรรม.

ดัชนี

• 1 มูลนิธิ
• 2 การเตรียมการ
• 3 ใช้
  • 3.1 การเสริมกำลังล่วงหน้า
  • 3.2 การวิเคราะห์โคลิฟอร์มทั้งหมดและอุจจาระ
• 4 การควบคุมคุณภาพของสื่อ
• 5 อ้างอิง

มูลนิธิ

สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างบางตัวอย่างขั้นตอนของการเสริมก่อนเป็นสิ่งจำเป็นที่จะสามารถกู้คืนจุลินทรีย์เฉพาะที่อาจอยู่ในปริมาณที่ต่ำมากหรือภายใต้เงื่อนไขที่ไม่เอื้ออำนวยที่ละเมิดหรือลดความมีชีวิต.

ดังกล่าวเป็นกรณีของอาหารแห้งและแปรรูปซึ่งอาจปนเปื้อนด้วย Salmonellas sp. ในกรณีเหล่านี้หากมีแบคทีเรียพวกเขาได้รับความเดือดร้อนจากการกระทำผิดทางร่างกายและทางเคมีในระหว่างกระบวนการผลิตของผลิตภัณฑ์.

ในลักษณะที่จุลินทรีย์สัมผัสกับปัจจัยที่ไม่พึงประสงค์เช่นการคายน้ำการสัมผัสกับสารยับยั้งหรือผลิตภัณฑ์ที่เป็นพิษและการทับซ้อนที่เกิดจากการปรากฏตัวของแบคทีเรียอื่น ๆ ในปริมาณที่มากขึ้น.

ในแง่นี้แลคโตสน้ำซุปมีผลในการซ่อมแซมโครงสร้างที่เสียหายของเชื้อจุลินทรีย์ทำให้มันสามารถกู้คืนและทำซ้ำในลักษณะที่สามารถตรวจพบได้.

ในทำนองเดียวกันน้ำซุปแลคโตสมีความสามารถในการเจือจางสารยับยั้งที่อาจส่งผลกระทบต่อการมีชีวิตของมันซึ่งช่วยในการพัฒนา นอกจากนี้องค์ประกอบทางโภชนาการของแลคโตสน้ำซุปเป็นกลยุทธ์เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของ Salmonella sp เหนือจุลินทรีย์อื่น ๆ.

สำหรับการระบุขั้นสุดท้ายมันจะต้องได้รับการปลูกฝังไปยังวิธีการอื่นของพืชชนิดอื่น.

ในทางกลับกันองค์ประกอบของสื่อยังช่วยให้ตรวจจับจุลินทรีย์ในการหมักแลคโตสที่ผลิตก๊าซ.

การจัดเตรียม

เพื่อเตรียมน้ำซุปแลคโตสหนึ่งลิตรให้ชั่งน้ำหนัก 13 กรัมของตัวกลางที่ถูกทำให้แห้งและละลายในน้ำกลั่น 1000 มิลลิลิตร.

เพื่อช่วยละลายตัวกลางในน้ำคุณสามารถให้ความร้อนเล็กน้อย แต่ไม่มากเกินไป.

เมื่อเป็นเนื้อเดียวกันการแก้ปัญหาจะถูกจัดทำขึ้นดังต่อไปนี้: ถ้าน้ำซุปถูกนำมาใช้เพื่อค้นหาโคลิฟอร์ม, ชั้นวางพร้อมหลอดทดลองและหลอดหมักเดอร์แฮมถูกคว่ำ.

ท่อ Durham เป็นรายละเอียดที่สำคัญมากเพราะมันจะช่วยให้สามารถตรวจจับการก่อตัวของก๊าซข้อมูลที่มีค่าในการค้นหาโคลิฟอร์ม.

เมื่อหลอดพร้อมแลคโตส 10 มล. จะถูกจ่ายเข้าไปซึ่งจะต้องเพียงพอที่จะครอบคลุมหลอดเดอแรมทั้งหมด.

หากน้ำซุปแลคโตสจะถูกใช้เป็นน้ำซุปก่อนการตกแต่งก็ไม่จำเป็นต้องวางท่อหมักเดอแรม ในกรณีนี้จำเป็นต้องใช้สื่อที่มีขนาดใหญ่ (225 มล.) ซึ่งจะให้บริการในขวด 500 มล. ปากกว้างและฝาเกลียวทนความร้อน.

ต่อจากนั้นหลอดหรือขวดจะถูกนำไปที่หม้อนึ่งความดันที่อุณหภูมิ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที.

สื่อควรคงอยู่ที่ค่า pH สุดท้ายที่ 6.9 ± 0.2 ที่ 25 ° C.

ไวน์จะถูกเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าพวกเขาจะใช้.

ก่อนใช้งานจะต้องมีน้ำซุปที่อุณหภูมิห้อง.

ในทางตรงกันข้ามน้ำซุปแลคโตสสามารถเตรียมได้ที่ความเข้มข้นสองเท่า.

ห้องปฏิบัติการบางแห่งเพิ่มสีม่วง bromocresol ลงในน้ำซุปแลคโตสเป็นตัวบ่งชี้ค่า pH เพื่อแสดงหลอดที่มีการหมักแลคโตสโดยการเปลี่ยนสี ในกรณีนี้น้ำซุปใช้สีม่วงและหากการหมักกลายเป็นสีเหลือง.

การใช้งาน

ในห้องปฏิบัติการแลคติกทางจุลชีววิทยานั้นถูกใช้อย่างกว้างขวางว่าเป็นอาหารที่ค่อนข้างมีราคาไม่แพงและให้ผลที่เชื่อถือได้และรวดเร็ว (24-48 ชั่วโมง).

มันสามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์ทั้งหมดและฟีโคลิฟอร์มในน้ำและอาหารหรือเป็นน้ำซุปที่เตรียมไว้ล่วงหน้าสำหรับ Salmonella.

Preenrichment

Pre-enrichment เป็นขั้นตอนก่อนการเพิ่มปริมาณตัวอย่างซึ่งช่วยปรับปรุงการฟื้นตัวของแบคทีเรียในสกุล Salmonella ในอาหารแปรรูป.

ในการทำเช่นนี้ตัวอย่างของอาหารแข็ง (25 กรัม) หรือของเหลว (25 มล.) จะถูกเพาะในแลคโตสน้ำซุป 225 มล. และบ่มเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมง จากนั้นน้ำซุปซีลีนซีสตีนหรือน้ำซุปเตตราเธโอเนตจะถูกย่อยในอาหารที่อุดม จากนั้นจะผ่านไปยังสื่อเก็บข้อมูล XLD และ SS.

การวิเคราะห์โคลิฟอร์มทั้งหมดและอุจจาระ

เป็นวิธีที่ดีเยี่ยมในการบ่งชี้การปนเปื้อนของอุจจาระ.

ดังนั้นแลคโตสน้ำซุปจึงเหมาะสำหรับขั้นตอนการสันนิษฐานของการศึกษาโคลิฟอร์มด้วยวิธีการที่น่าจะเป็นไปได้มากที่สุด.

สำหรับตัวอย่างที่สงสัยว่ามีโคลิฟอร์มในปริมาณมากโคลิฟอร์มในปริมาณน้อยจะถูกฉีดวัคซีน (1 มล.) ในขณะที่สำหรับตัวอย่างที่สงสัยว่ามีโคลิฟอร์มในปริมาณที่ต่ำกว่า.

มีการเจือจาง 10 ครั้งสำหรับการวิเคราะห์^-1, 10^-2, 10^-3, สร้างแบตเตอรี่ 3-5 หลอดสำหรับแต่ละความเข้มข้นที่ใช้.

จากการเจือจางแต่ละปริมาตรเดียวกันจะถูกหว่านลงในน้ำซุปแลคโตส.

หลอดจะถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง น้ำซุปที่ติดลบจะถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง.

การตีความผลลัพธ์ทำได้โดยการสังเกตสองลักษณะ: สิ่งแรกคือการมีหรือไม่มีความขุ่นและเนื่องจากสื่อนี้ไม่มีตัวบ่งชี้ค่า pH จึงไม่มีการเปลี่ยนแปลงสี.

ประการที่สองคือการผลิตหรือไม่ของก๊าซ แก๊สสามารถแสดงได้อย่างง่ายดายในหลอดเดอร์แฮมโดยมีลักษณะของฟองอากาศหนึ่งหรือหลายฟองอยู่ภายใน.

จะถือว่าเป็นบวกถ้าสังเกตทั้งสองลักษณะนั่นคือความขุ่นกับการผลิตก๊าซ หลอดที่เป็นบวกควรนำมาเพาะใหม่ในสื่อยืนยัน (น้ำซุปสีเขียวสดใส 2% น้ำดีและน้ำซุป EC).

การควบคุมคุณภาพของสื่อ

- ในการเตรียมสื่อมันเป็นสิ่งสำคัญที่จะไม่ลืมที่จะวางท่อ Durhams ถ้าจุดประสงค์เดียวกันคือการศึกษาโคลิฟอร์ม.

- อย่าให้ความร้อนสูงเกินไปก่อนที่จะฆ่าเชื้อ.

- แจกจ่ายในหลอดทดลองก่อนที่จะฆ่าเชื้อไม่เคยหลังจาก.

- ห้ามใช้ถ้าสื่อมีการเตรียมมากกว่า 3 เดือน.

- อย่าใช้ถ้าคุณสังเกตเห็นการเปลี่ยนแปลงใด ๆ ในลักษณะปกติของสื่อ.

- เมื่อเตรียมน้ำซุปแลคโตสเป็นชุดให้ทดสอบคุณภาพของมันด้วยการปลูกสายพันธุ์ที่รู้จักกันในชื่อ Escherichia coli, Enterobacter aerogenes , Citrobacter freundii และ Klebsiella pneumoniae. พวกเขาเติบโตได้ดีมากด้วยการผลิตก๊าซ (การควบคุมเชิงบวก).

- มันยังสามารถรวม Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium หรือ Enterococcus faecalis, ที่เติบโตได้ดี แต่ไม่มีการผลิตก๊าซ (การควบคุมเชิงลบ).

- ควรสังเกตว่าสีดั้งเดิมของตัวกลางที่ถูกอบแห้งนั้นจะเป็นสีเบจและของตัวกลางนั้นจะเตรียมสีเหลืองที่ชัดเจนและโปร่งใสมาก หากมีการเปลี่ยนสีหรือลักษณะที่ปรากฏอาจมีการเสื่อมสภาพของที่เดียวกัน.

การอ้างอิง

1. Acevedo R, Severiche C, Castillo M. ชีววิทยาและจุลชีววิทยาสิ่งแวดล้อม (2013) รุ่นที่ 1 มหาวิทยาลัย Cartagenas โคลัมเบีย.
2. Camacho A, ไจล์ส M, Ortegón A, Palao M, Serrano B และVelázquez O. (2009) เทคนิคการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหาร ฉบับที่ 2 คณะเคมี UNAM เม็กซิโก.
3. Laboratories Conda Pronadisa 2017. แลคโตสน้ำซุปเข้มข้นคู่ (ยุโรป Pharm.)
4. Fernández-Rendón C, Barrera-Escorcia G. การเปรียบเทียบเทคนิคการสกัดแบคทีเรียโคลิฟอร์มจากตะกอนทะเลสาบ Xochimilco ประเทศเม็กซิโก. เงินรายได้ Microbiol.  2013; 45 (3): 180-184 มีจำหน่ายที่: scielo.org.
5. Sotomayor F, Villagra V, Cristaldo G, Silva L, Ibáñez L. ความมุ่งมั่นของคุณภาพทางจุลชีววิทยาของน้ำบาดาลบ่อบาดาลของอำเภอของภาคกลาง, Cordillera และทุนเทศบาล. Mem. Inst. Investig. Cienc สุขภาพ 2013; 11 (1): 5-14 วางจำหน่ายจาก: scielo.iics.