Simple Staining คืออะไร คุณสมบัติเด่น
การย้อมสีง่าย เป็นขั้นตอนการย้อมสีที่รวดเร็วและเรียบง่ายซึ่งใช้สีย้อมเดียวจึงเรียกว่าง่าย ส่วนใหญ่จะใช้เพื่อกำหนดสัณฐานวิทยาและการจัดเรียงของเซลล์ที่มีอยู่ในตัวอย่าง.
เซลล์ตามธรรมชาติไม่มีสีดังนั้นจึงจำเป็นต้องทำให้มองเห็นได้ในบางวิธีเมื่อสังเกตในกล้องจุลทรรศน์.
เป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องเน้นว่าสีย้อมที่ใช้ในการย้อมสีอย่างง่ายจะต้องมีค่าใช้จ่ายพื้นฐาน (ประจุบวก) เพื่อให้สามารถจับกับผนังเซลล์และไซโตพลาซึม.
โครงสร้างเซลล์เหล่านี้มีประจุลบ นี่คือเหตุผลว่าทำไมสีย้อมที่มีประจุบวกจะถูกดึงดูดเข้าสู่เซลล์และจับกับพวกมันเองตามธรรมชาติ ดังนั้นเซลล์ทั้งหมดที่มีอยู่ในตัวอย่างจึงเป็นสีที่รวดเร็ว.
สีย้อมใช้ในการย้อมสีง่าย
มีสีย้อมพื้นฐานหลายอย่างที่สามารถใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา ใช้มากที่สุดคือ:
- เมทิลีนสีน้ำเงิน.
- คริสตัลสีม่วง.
- หินมาลาฮีทสีเขียว.
- ฟูเชียนขั้นพื้นฐาน.
สีย้อมทั้งหมดเหล่านี้ทำงานได้ดีในแบคทีเรียเพราะมีประจุบวก (ประจุบวก) สี (โครโมโซม).
เวลาย้อมสีสำหรับสีย้อมเหล่านี้ส่วนใหญ่ค่อนข้างสั้น พวกเขามักจะอยู่ในช่วงตั้งแต่ 30 วินาทีถึง 2 นาทีขึ้นอยู่กับความสัมพันธ์ของสีย้อม.
โปรดจำไว้ว่าก่อนที่จะทำการย้อมสีตัวอย่างด้วยการย้อมสีง่าย ๆ นั้นจะต้องขยายและจับจ้องไปที่สไลด์แก้ว (สไลด์); ตัวอย่างแบบขยายและแบบคงที่เรียกว่าสเมียร์.
6 ขั้นตอนในการย้อมสีง่าย ๆ
ขั้นตอนที่ 1
วางสไลด์บนชั้นวางย้อมแล้วใช้สีย้อมที่ต้องการ ปล่อยให้เวลาที่สอดคล้องกัน.
โดยปกติการย้อมสีง่าย ๆ ใช้เวลาไม่กี่วินาทีหรือสองสามนาทีขึ้นอยู่กับสีที่ใช้.
การสังเกต
ในขั้นตอนนี้สิ่งสำคัญคือต้องไม่เกินเวลาที่แนะนำสำหรับสีย้อมที่ใช้เนื่องจากคริสตัลสามารถก่อตัวขึ้นบนแผ่นงานทำให้เกิดสิ่งที่เรียกว่า "สิ่งประดิษฐ์" ที่บิดเบือนรูปร่างของเซลล์.
ขั้นตอนที่ 2
ล้างรอยเปื้อนของสไลด์ด้วยน้ำกลั่นจากขวดอย่างระมัดระวังหรือด้วยน้ำประปาที่ไหลช้าๆจนกว่าน้ำท่าจะโปร่งใส โดยปกติจะใช้เวลา 5 ถึง 10 วินาที.
การสังเกต
อย่าใช้น้ำที่ไหลโดยตรงบนรอยเปื้อนเพื่อป้องกันแรงเดียวกันจากการทำลายตัวอย่าง.
หากคุณไม่มีน้ำกลั่นคุณสามารถใช้น้ำประปาได้โดยไม่มีปัญหาเพราะจะไม่มีผลต่อการย้อมสี.
ขั้นตอนที่ 3
เช็ดให้แห้งด้วยผ้าขนหนูกระดาษดูดซับในทิศทางเดียวและไม่มีการถู ตรวจสอบให้แน่ใจว่าด้านล่างของสไลด์นั้นสะอาด.
ขั้นตอนที่ 4
สังเกตรอยเปื้อนเปื้อนในกล้องจุลทรรศน์ เริ่มต้นด้วยวัตถุประสงค์ที่ห่างไกลที่สุดเพื่อค้นหาพื้นที่ที่คุณต้องการสังเกตอย่างละเอียด เปลี่ยนวัตถุประสงค์เพื่อให้เข้าใกล้ตัวอย่างมากขึ้น.
การสังเกต
สำหรับการใช้เลนส์ที่มีกำลังขยายสูงสุด (ปกติคือ 100 เท่า) ควรใช้น้ำมันแช่เนื่องจากจะช่วยให้แสงส่องผ่านได้ดีขึ้นและภาพจะคมชัดขึ้น ไม่จำเป็นต้องใช้ผ้าคลุม.
ขั้นตอนที่ 5
ในที่สุดให้ทิ้งตัวอย่างทั้งหมดในภาชนะที่เหมาะสมและมีการระบุว่า "Biohazard" อย่างเหมาะสม.
การอ้างอิง
- (2001). การประยุกต์ใช้ทางจุลชีววิทยา: คู่มือปฏิบัติการทางจุลชีววิทยาทั่วไป (8 TH Ed.) บริษัท McGraw-Hill.
- Harisha, S. (2006). ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับเทคโนโลยีชีวภาพเชิงปฏิบัติ (1เซนต์) ไฟร์วอลล์สื่อ.
- Moyes, R. B. , Reynolds, J. , & Breakwell, D. P. (2009) การย้อมสีเบื้องต้นของแบคทีเรีย: คราบง่าย. โปรโตคอลปัจจุบันทางจุลชีววิทยา, (SUPPL 15), 1-5.
- Pommerville, J. (2013). ห้องปฏิบัติการของ Alcamo ความรู้พื้นฐานด้านจุลชีววิทยา (10TH) Jones & Bartlett Learning.
- เพรสคอตต์, H. (2002). การออกกำลังกายในห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยา (5 TH) บริษัท McGraw-Hill.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). หลักการทางจุลชีววิทยา (1เซนต์) Tata McGraw-Hill Education.