การเตรียมสื่อวัฒนธรรมสิ่งที่ประกอบไปด้วยวัตถุประสงค์และขั้นตอน

การเตรียมสื่อวัฒนธรรม มันเป็นวิธีการประจำที่ใช้ในห้องปฏิบัติการสำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่ต้องการ สื่อการเพาะเลี้ยงคือการเตรียมที่เป็นของแข็งของเหลวหรือกึ่งแข็งที่มีสารอาหารทั้งหมดที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาของประชากรจุลินทรีย์.

โดยทั่วไปหมายถึงการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่อุดมไปด้วยโปรตีนและกรดอะมิโนและมักจะมีองค์ประกอบบางอย่างที่เอื้อต่อการเจริญเติบโตของสิ่งมีชีวิตที่คุณต้องการศึกษาเช่นวิตามินเลือดเซรั่มในหมู่คนอื่น ๆ.

ไม่มีวัฒนธรรมกลางหรือวัฒนธรรมสากลเนื่องจากองค์ประกอบของมันแตกต่างกันไปตามความต้องการของจุลินทรีย์ที่น่าสนใจ แบคทีเรียบางชนิดสามารถพัฒนาในอาหารเลี้ยงเชื้อได้ แต่บางชนิดมีข้อกำหนดพิเศษ.

ดัชนี

• 1 ประกอบด้วยอะไร?
  • 1.1 วุ้น
  • 1.2 ของเหลว
  • 1.3 สารสกัด
  • 1.4 Peptones
  • 1.5 โช้คอัพ
• 2 วัตถุประสงค์
• 3 ประเภทของสื่อ
  • 3.1 ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของมัน
  • 3.2 ขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์
• 4 ขั้นตอน
• 5 อ้างอิง

มันประกอบด้วยอะไร??

จุลินทรีย์เช่นเชื้อราและแบคทีเรียไม่สามารถศึกษาเป็นรายบุคคลได้เนื่องจากมีขนาดเล็ก ดังนั้นพวกเขาจะต้องได้รับการปลูกฝังในวิธีการประดิษฐ์ที่อนุญาตให้เพิ่มขึ้นอย่างมากในประชากร.

ตัวอย่างเช่นหากเราต้องการศึกษาแบคทีเรียเราต้องให้เงื่อนไขที่เหมาะสมกับพวกมันเพื่อให้พวกมันสามารถแพร่ขยายและสร้างอาณานิคม (ซึ่งสามารถสังเกตได้ด้วยตาเปล่า).

การเตรียมสื่อการเลี้ยงแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ที่เราต้องการเพาะปลูก ก่อนที่จะเตรียมมันจำเป็นต้องรู้ความต้องการทางโภชนาการขั้นพื้นฐานของร่างกายของงาน.

ถัดไปส่วนประกอบที่พบมากที่สุดที่ใช้ในสื่อวัฒนธรรมจะได้รับการอธิบายให้มีความคิดทั่วไปเกี่ยวกับการเตรียมการของพวกเขา:

วุ้น

มันถูกใช้ในพืชเป็นสารก่อเจลและถูกเพิ่มเข้ามาเมื่อมองหาสื่อที่เป็นของแข็งหรือกึ่งของแข็ง สารทำให้แข็งตัวตัวแรกที่ใช้ในการเตรียมสารคือเจลาติน แต่ในปี ค.ศ. 1883 วุ้นถูกนำเข้าสู่โลกของแบคทีเรียวิทยาโดย W. Hesse.

แบคทีเรียในแบคทีเรียมีส่วนประกอบหลักคือโพลีแซคคาไรด์ของกิ่งที่ซับซ้อนที่สกัดจากสาหร่าย สารประกอบนี้ใช้เป็นสารข้นสำหรับอาหารทั่วไปเช่นไอศครีมและแยม.

มันเป็นองค์ประกอบที่มีคุณค่ามากในจุลชีววิทยาด้วยเหตุผลหลายประการ สาเหตุหลักมาจากจุลินทรีย์ไม่สามารถย่อยสลายได้ของเหลวที่อุณหภูมิ 100 ° C และยังคงอยู่ในสถานะของเหลวจนกว่าจะถึง 45 ° C หรือน้อยกว่า.

ในกรณีที่คุณต้องการเตรียมอาหารเลี้ยงที่เป็นของแข็งความเข้มข้นของวุ้นควรอยู่ที่ประมาณ 1.5% ในขณะที่สารกึ่งของแข็งควรเตรียมจาก 0.3 ถึง 0.5%.

ของเหลว

การพัฒนาสิ่งมีชีวิตที่ทำให้เกิดโรคต้องใช้ของเหลวในร่างกายเพื่อให้พวกเขาสามารถพัฒนาตามที่พวกเขาต้องการในสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติของพวกเขา ด้วยเหตุนี้เลือดทั้งหมดหรือช็อกไฟฟ้าถูกเพิ่มเข้าไป สารสกัดจากสัตว์ที่มีสุขภาพดีและเมื่อผ่านการฆ่าเชื้อแล้วจะถูกเพิ่มเข้าไปในอาหารเลี้ยงเชื้อ.

ข้อความที่ตัดตอนมา

พวกเขาได้มาจากส่วนต่าง ๆ ของสัตว์ (เช่นเนื้อหรือตับ) หรือผัก (เมล็ด) และประมวลผลเพื่อให้ได้สมาธิที่มั่นคงในรูปแบบของการวางหรือผง ที่พบมากที่สุดคือยีสต์มอลต์และเนื้อสัตว์.

Peptonas

สารประกอบอินทรีย์เหล่านี้ได้มาจากการย่อยด้วยเอนไซม์หรือสารเคมีของเนื้อเยื่อของสัตว์หรือผัก วัตถุประสงค์คือเพื่อเพิ่มเนื้อหาที่อุดมด้วยกรดอะมิโนซึ่งเป็นหน่วยพื้นฐานของโปรตีน.

โช้คอัพ

ระบบบัฟเฟอร์หรือบัฟเฟอร์หลีกเลี่ยงการเปลี่ยนแปลงค่า pH อย่างกะทันหันและช่วยรักษาช่วงที่เหมาะสมที่สุดที่ร่างกายจะทนได้.

สิ่งมีชีวิตส่วนใหญ่สามารถพัฒนาได้อย่างเหมาะสมที่ค่าความเป็นกรดด่างเท่ากับ 7 ถึงแม้ว่าแบคทีเรียบางตัวจะชอบสื่อที่เป็นด่าง อย่างไรก็ตามมีแบคทีเรียที่ต้านทานการเปลี่ยนแปลงค่า pH ระหว่างค่าของ 6 และ 9.

ในสายพันธุ์ที่ไวต่อค่า pH ความเสียหายนั้นไม่ได้เกิดจากไฮโดรเจนหรือไฮดรอกซิลในปริมาณที่มากเกินไป แต่โดยการเพิ่มขึ้นของกรดหรือเบสที่อ่อนแอซึ่งสามารถเจาะเซลล์.

นอกจากนี้ยังมีตัวบ่งชี้ว่ามีค่า pH ในการตรวจสอบและหลีกเลี่ยงการเบี่ยงเบนที่เกิดจากการหมักหรือกระบวนการอื่น ๆ.

วัตถุประสงค์

วัตถุประสงค์หลักเมื่อเตรียมสื่อวัฒนธรรมคือการเพิ่มองค์ประกอบที่จำเป็นทั้งหมดเพื่อให้การพัฒนาสิ่งมีชีวิตที่ประสบความสำเร็จที่ต้องการแยก การรวมกันของส่วนประกอบและสารอาหารที่มีประสิทธิภาพที่สุดจะต้องมีการระบุเพื่อให้ได้สื่อที่ต้องการ.

ทั้งการเตรียมและการเก็บรักษาสื่อมีความสำคัญต่อการเติบโตที่ประสบความสำเร็จเนื่องจากขั้นตอนเหล่านี้ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของสิ่งแวดล้อมและความพร้อมของสารอาหาร.

ต้องคำนึงถึงว่าการเพาะเลี้ยงเชื้อจุลินทรีย์เป็นงานที่ได้รับผลกระทบจากปัจจัยหลายอย่างที่อยู่ภายนอกสื่อการเลี้ยงเช่นความเข้มของแสงที่ได้รับอุณหภูมิและระดับความเป็นกรดหรือความเป็นด่างของสื่อ ดังนั้นจึงต้องคำนึงถึงตัวแปรเหล่านี้แต่ละตัวด้วย.

ประเภทของสื่อ

ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของมัน

ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของมันมีสามประเภทหลักของพืช: ธรรมชาติหรือเชิงประจักษ์กึ่งสังเคราะห์และวิธีการสังเคราะห์หรือสารเคมีที่กำหนดไว้.

สภาพแวดล้อมทางธรรมชาติ

ในสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติไม่ทราบองค์ประกอบที่แน่นอน เหล่านี้รวมถึงส่วนผสมเช่นนม, เลือดเจือจาง, น้ำผัก, สารสกัดและ infusions ของเนื้อสัตว์และ peptons ด้วยเหตุผลทางเศรษฐกิจมักมีการเพิ่มส่วนประกอบต้นทุนต่ำเช่นสารสกัดจากถั่วเหลืองเวย์กากน้ำตาล ฯลฯ.

สื่อกึ่งสังเคราะห์

มันถูกเรียกว่าสื่อกึ่งสังเคราะห์ถ้าองค์ประกอบของมันเป็นที่รู้จักกันเพียงบางส่วน สื่อใดก็ตามที่มี agar จะกลายเป็นสื่อกึ่งสังเคราะห์.

ในหมู่พวกเขาเรามีพ่อเด็กซ์โรสอาการ์, czapek-dox วุ้น, ข้าวโอ๊ตวุ้น, เปปโตนเนื้อวุ้น, ตัวอย่างอื่น.

สารสังเคราะห์หรือสารเคมีที่กำหนดไว้

ในกรณีนี้องค์ประกอบของสื่อ - ในแง่ของปริมาณคาร์บอนไนโตรเจนซัลเฟอร์ฟอสฟอรัสและแหล่งปัจจัยการเจริญเติบโตอื่น ๆ - เป็นที่รู้จักอย่างเต็มที่ มันมีประโยชน์มากถ้าคุณต้องการได้ผลลัพธ์ที่ทำซ้ำได้สำหรับนักวิจัยคนอื่น ๆ.

สำหรับสิ่งที่เรียกว่า "จุลินทรีย์ที่มีความต้องการการเจริญเติบโตพิเศษ" มีความจำเป็นต้องเพิ่มส่วนประกอบที่จำเป็น ตัวอย่างของประเภทนี้คือ แลคโตบาซิลลัส.

ขึ้นอยู่กับชนิดของเชื้อจุลินทรีย์

ในทำนองเดียวกันมีการจัดหมวดหมู่อื่นสำหรับสื่อวัฒนธรรมตามชนิดของจุลินทรีย์ที่สามารถเติบโตได้ การปฏิบัติตามหลักการนี้เรามีวิธีทั่วไปในการเพิ่มคุณค่าเลือกและแตกต่างกันดังต่อไปนี้ แต่ละอันอธิบายไว้ด้านล่าง:

วิธีการทั่วไป

สิ่งเหล่านี้ยอมรับการพัฒนาของจุลินทรีย์หลากหลายชนิด หากสิ่งมีชีวิตใด ๆ ต้องการเงื่อนไขพิเศษสำหรับการเจริญเติบโตมันจะไม่สามารถพัฒนาได้สำเร็จในพืชชนิดนี้.

การเพิ่มคุณค่าหมายถึง

วิธีการเพิ่มคุณค่านั้นเอื้อต่อการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์บางชนิด แต่ไม่มีการเติมสารใด ๆ เพื่อป้องกันไม่ให้จุลินทรีย์ชนิดอื่นเจริญเติบโตในนั้น.

สื่อที่เลือก

พวกเขามองหาการเจริญเติบโตที่เฉพาะเจาะจงของจุลินทรีย์เรียกว่าเชื้อราแบคทีเรียโปรโตซัวและอื่น ๆ เมื่อต้องการทำเช่นนี้พวกเขายับยั้งการพัฒนาของผู้อื่น.

เพื่อให้บรรลุเป้าหมายนี้สามารถเพิ่มสารเคมีร้ายแรงสำหรับกลุ่มจุลินทรีย์ขนาดใหญ่และไม่เป็นอันตรายต่อสิ่งมีชีวิตที่น่าสนใจหรือเพิ่มแหล่งพลังงานที่สามารถดูดกลืนโดยจุลินทรีย์ที่ต้องการ.

เลือกใช้สื่อเมื่อนำตัวอย่างทางการแพทย์เพื่อที่จะเติบโตจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค ที่นี่มันเป็นสิ่งจำเป็นที่จะสนับสนุนการเจริญเติบโตของเชื้อโรคและยับยั้งการพัฒนาของจุลินทรีย์ปกติจากผู้ป่วย.

ยกตัวอย่างเช่นบิสมัทซัลไฟต์ไม่อนุญาตให้มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกและแบคทีเรียจำนวนมากที่พบในช่องทางเดินอาหาร ดังนั้นจึงใช้ในการเพาะเชื้อแบคทีเรียแกรมลบที่ทำให้เกิดไข้ไทฟอยด์, Salmonella typhi ในตัวอย่างอุจจาระ.

สื่อที่แตกต่าง

ประเภทนี้ใช้คุณสมบัติการวินิจฉัยบางอย่างของสิ่งมีชีวิตที่น่าสนใจ (เช่นลักษณะเฉพาะในการเผาผลาญอาหารของมัน) เพื่อให้สามารถระบุพวกมันกับสายพันธุ์อื่นที่เติบโตในสภาพแวดล้อมเดียวกัน.

ทั้งสื่อดิฟเฟอเรนเชียลและสื่อคัดสรรมีประโยชน์อย่างมากในสาขาจุลชีววิทยาคลินิกและการสาธารณสุขเนื่องจากสาขาวิชาเหล่านี้จำเป็นต้องตรวจสอบการมีอยู่ของจุลินทรีย์เฉพาะที่เกี่ยวข้องกับสภาพหรือเงื่อนไขด้านสุขอนามัยที่ไม่ดี.

สามารถเพิ่มสารบ่งชี้ไปยังพืชที่ให้คุณสมบัติที่โดดเด่นให้กับอาณานิคมที่ต้องการ ตัวอย่างเช่น agar-eosin-methylene blue (ตัวย่อ EMB) และ MacConkey-agar จะถูกเพิ่มด้วยแลคโตสและตัวบ่งชี้ pH.

ดังนั้นเมื่ออาณานิคมได้รับการพัฒนาในสื่อเหล่านี้ด้วยความสามารถในการหมักแลคโตสและผลิตอัลดีไฮด์พวกเขาสามารถสังเกตได้ในสีพิเศษ.

ขั้นตอน

ปัจจุบันสื่อวัฒนธรรมสามารถหาซื้อได้ในรูปแบบแห้ง ดังนั้นการเตรียมการจึงอำนวยความสะดวกและมีเพียงการคืนผลิตภัณฑ์ ต้องชั่งน้ำหนักเนื้อหา (โดยคำนึงถึงปริมาณสุดท้ายที่คุณต้องการเตรียม) และละลายในน้ำกลั่นตามข้อบ่งชี้ทั้งหมดของผลิตภัณฑ์.

เนื้อหาของสื่อของเหลวจะต้องแบ่งออกเป็นภาชนะที่ต้องการ (จานเลี้ยงเชื้อหลอด ฯลฯ ) สำหรับการฆ่าเชื้อที่ตามมา ในการกระจายสื่อที่เป็นของแข็งมันเป็นสิ่งจำเป็นที่จะละลายมันโดยใช้ไมโครเวฟหรือโดยการยัดเยียดวัสดุไปยังอ่างน้ำ ต้องปรับค่า pH ของสื่อ.

โดยปกติจะใช้วุ้นในหลอดทดลองหรือในจานเลี้ยงเชื้อ หากวุ้นแข็งตัวในตำแหน่งเอียงโดยมีมุมที่เหมาะสมเพื่อให้ขอบขั้วสุดท้ายเป็นเส้นทแยงมุมการจัดเรียงนี้จะเรียกว่ายอดเขาขลุ่ยหรือท่อเอียง เมื่อวุ้นแข็งตัวในตำแหน่งแนวตั้งเต็มที่จะเรียกว่า "ลึก".

หลังจากการฆ่าเชื้อสื่อ - โดยใช้หม้อนึ่งความดัน - พวกเขาได้รับอนุญาตให้เย็น สิ่งเหล่านี้จะต้องได้รับการจัดการในสภาพแวดล้อมที่ปราศจากจุลินทรีย์โดยทั่วไปจะทำงานกับไฟที่มีแสงสว่างน้อยเพื่อให้แน่ใจว่าสภาพแวดล้อมปลอดเชื้อในบริเวณใกล้เคียง.

การอ้างอิง

1. เซลิส, เจอี (2549). ชีววิทยาของเซลล์: คู่มือปฏิบัติการ (บทที่ 2) เอลส์.
2. Finegold, S.M. , Bailey, W.R. , Baron, E.J. , Fineglod, S.M. , & Scott, E.G. (1991). Bailey Scott: การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา. แพนอเมริกันเมดิคัล.
3. Olivas, E. (2004). คู่มือปฏิบัติงานจุลชีววิทยา I และ II และปรสิตวิทยา. มหาวิทยาลัยอิสระแห่งซิวดัดฮัวเรซ.
4. Schlegel, H. G. , & Zaborosch, C. (1993). จุลชีววิทยาทั่วไป. สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเคมบริดจ์.
5. Tortora, G. J. , Funke, B. R. , และ Case, C. L. (2007). จุลชีววิทยาเบื้องต้น. Ed. Panamericana การแพทย์.